Côté hôte du processus d’infection virale
Pour la recherche virologique, des organismes modèles sont parfois utilisés, mais ils n’imitent guère la morphologie de l’hôte humain. Les chercheurs s’appuient donc plus souvent sur des études de tissus humains, de biopsies ou de cultures cellulaires.
Les modèles d’infection ex vivo peuvent être générés à partir de tissus, de biopsies ou de modèles animaux. Ces modèles peuvent être étudiés à l’aide de stéréomicroscopes Leica.
Les cultures cellulaires, les sphéroïdes et les organoïdes peuvent être suivis grâce aux microscopes Leica à grand champ (composés).
Des recherches approfondies sur des modèles de contamination, des cultures cellulaires en 2D ou 3D, sont réalisées à l’aide de microscopes à fluorescence Leica plus sophistiqués, tels que les imageurs THUNDER.
Une analyse génétique plus fiable en aval peut être effectuée avec la microdissection laser de Leica Microsystems qui isole des cellules spécifiques des tissus environnants.
Des exemples d’applications cocernant les virus menées avec les solutions Leica sont présentés dans cette note d’application : Microscopie en virologie.
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Imagerie en fluorescence haute résolution pour la recherche en virologie
La microscopie en haute résolution constitue un atout majeur pour l’étude des maladies infectieuses, car elle permet de suivre les virus ou les agents pathogènes responsables. Combinée au marquage en fluorescence des composants cellulaires ou viraux, elle permet d'explorer les multiples aspects des processus infectieux.
Ainsi, la microscopie confocale à balayage laser et la microscopie par fluorescence à réflexion interne totale (TIRF) pour une super-résolution constituent des instruments de premier choix pour la recherche virale.
Les techniques de microscopie avancées, telles que la microscopie multiphotonique et à feuille de lumière, peuvent vous donner accès à des événements infectieux se produisant dans différents contextes, tels que des coupes de tissus, des modèles animaux et des modèles d’infection en 3D comme les organoïdes.
Les microscopes Leica qui vous offrent des avantages pour l’étude d'échantillons 3D concernant la recherche sur la virologie comprennent la plateforme confocale STELLARIS et les solutions TIRF.
Image et diagramme adaptés de Coomer et al. PLOS Pathogen (2020) 16(2) : e1008359, DOI: 10.1371/journal.ppat.1008359
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Ultrastructure des virus
Pour évaluer l’ultrastructure des virus, il faut une résolution proche de 1 nm. Actuellement, cette résolution ne peut être obtenue qu’avec la microscopie électronique. La cryomicroscopie électronique peut même atteindre une résolution inférieure au nanomètre.
La résolution ultrastructurale vous permet de voir réellement l’interaction entre l’hôte et le virus à l’échelle nanométrique, ainsi que de confirmer les résultats de différentes technologies analytiques et d’identifier les sites cibles potentiels des médicaments. En outre, les ligands ou les petites molécules des récepteurs de surface cellulaire ciblés lors des interactions entre les particules virales sont essentiels à la conception guidée par la structure des vaccins et des inhibiteurs d’entrée virale.
Pour la cryomicroscopie électronique et la microscopie conventionnelle, la préparation de l’échantillon est cruciale. Elle nécessite un équipement et une expertise spécifiques que Leica Microsystems vous propose grâce à un vaste portefeuille de préparation d’échantillons pour la ME et aux conseils éclairés de Leica.