Microscopi per campo scuro
Quando si lavora al microscopio, il metodo di contrasto più comunemente utilizzato è il campo chiaro. Tuttavia, il campo chiaro solitamente fornisce solo un'immagine a basso contrasto di molti campioni biologici trasparenti. Questo metodo può essere utilizzato anche per molti campioni di materiali trasparenti o riflettenti opachi. In queste immagini a basso contrasto si distinguono pochi dettagli. Il contrasto della microscopia in campo chiaro per i campioni biologici può essere migliorato utilizzando coloranti selettivi, ma spesso sono tossici per le cellule. Grazie al microscopio per campo scuro è possibile visualizzare le strutture di molti tipi di campioni biologici con maggior contrasto senza la necessità di utilizzare nessuna colorazione. La microscopia in campo scuro può anche aumentare il contrasto durante l'acquisizione di immagini in campioni in campo industriale. Il metodo di contrasto in campo oscuro sfrutta la diffrazione o la dispersione della luce da strutture di un campione biologico o da caratteristiche non uniformi nella struttura di un materiale.
I microscopi Leica per campo scuro sono utili per lo studio di cellule o tessuti in diverse applicazioni scientifiche e forensi. La microscopia in campo scuro può essere utile anche per applicazioni nello studio dei materiali e nella scienza della terra.
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Che cos'è il campo scuro?
Il campo scuro è una tecnica di contrasto ottico che rende visibili le strutture anche non colorate nelle cellule di campioni biologici. Le strutture cellulari che appaiono trasparenti con l’illuminazione a campo chiaro possono essere visualizzate con un contrasto migliore e con più dettagli utilizzando il campo scuro. Inoltre, le caratteristiche non uniformi di un materiale trasparente o della superficie di campioni di materiale opaco possono essere osservate più facilmente con il campo scuro rispetto al campo chiaro. Le strutture nella cellula o le caratteristiche del materiale diffondono la luce che interagisce con esse, mentre le aree uniformi permettono alla luce di passare senza diffondersi. Quando si utilizza la microscopia in campo scuro, le strutture cellulari o le caratteristiche del materiale appaiono più luminose e lo sfondo uniforme della cellula o del materiale appare più scuro.
Per cosa si può usare un microscopio per campo scuro? Che tipo di campioni è possibile visualizzare?
Molto spesso i campioni biologici e i tessuti, fissi o vivi, vengono osservati con un microscopio per campo scuro. Inoltre, vari materiali e campioni geologici possono essere osservati in campo scuro. Per maggiori informazioni fare riferimento agli articoli: "Work More Efficiently in Developmental Biology With Stereo Microscopy: Zebrafish, Medaka, and Xenopus" e "How to Adapt Grain Size Analysis of Metallic Alloys to Your Needs"
La luce a forma di anello che passa attraverso l'apertura viene messa a fuoco dal condensatore sul campione biologico o sul materiale da osservare. Porzioni della luce a forma di anello vengono diffratte o disperse da strutture del campione o dalle caratteristiche del campione stesso. La luce diffratta entra nell'obiettivo. Al contrario, la porzione di luce ad anello che passa direttamente attraverso il campione senza subire deviazioni o che viene riflessa dal campione senza dispersioni non viene raccolta dall'obiettivo. La luce diffusa dalle strutture dell'esemplare o dalle caratteristiche del campione apparirà più luminosa rispetto alle aree di sfondo dell'esemplare o del campione in cui non c'è dispersione di luce.
Per ulteriori informazioni, fare riferimento all'articolo: "Metallography - an Introduction"
Domande frequenti sui microscopi per campo scuro
Un microscopio per campo scuro è simile a un microscopio convenzionale per campo chiaro, ma utilizza un'apertura ad anello davanti alla sorgente luminosa. La luce proveniente dall'illuminazione in campo scuro colpisce il campione con un elevato angolo di incidenza, viene trasmessa attraverso il campione o si riflette sulla sua superficie, passa attraverso l'obiettivo e infine attraversa gli oculari o raggiunge il sensore della fotocamera. L'illuminazione in campo scuro fa sì che aree uniformi di campioni trasparenti o superfici piane di campioni opachi appaiano scure, poiché la maggior parte della luce ad alto angolo di incidenza non raggiunge l'obiettivo. Normalmente, nei campioni trasparenti o sulla superficie dei campioni opachi sono presenti caratteristiche che diffondono la luce. Per questo motivo, le immagini in microscopia in campo scuro mostrano uno sfondo scuro con aree più luminose corrispondenti a queste caratteristiche, perché la luce che esse diffondono entra nell'obiettivo.
Sì, un campione biologico vivo, come le cellule o un organismo, può essere osservato facilmente con un microscopio per campo scuro.
Sì, un microscopio per campo scuro può essere dotato di una fotocamera per la registrazione delle immagini osservate con questo metodo di contrasto. Può anche essere equipaggiato con altri accessori. Per ulteriori informazioni, contattare il proprio rappresentante Leica locale.
