Leica LMD6 & LMD7 레이저 미세절단 현미경 시스템
레이저 미세절단 현미경 시스템 (Laser Microdissection, LMD) 또는 레이저 캡처 미세절단 현미경 시스템 (Laser Capture Microdissection, LCM)를 이용하면 특정 단일 세포나 전체 조직 영역을 분리할 수 있습니다. 특수한 레이저 설계와 강력한 소프트웨어가 장점인 Leica LMD 시스템을 이용하면 전체 조직 영역에서 단일 세포나 염색체 같은 준세포 구조에 이르는 관심 영역(Regions of Interest, ROI)을 손쉽게 분리할 수 있습니다.
동일한 원리에 기반을 둔 두 가지 시스템
일반적으로 LMD는 유전체학(DNA), 전사체학(mRNA, miRNA), 단백질체학, 대사체학 및 차세대 염기서열분석(NGS)에 사용됩니다. 신경학, 암 연구, 식물 분석, 법의학 또는 기상 연구 분야의 연구자들은 이 방법에 의존합니다. 뿐만 아니라, LMD는 생세포 배양(LCC), 복제 및 재배양, 조작 또는 다운스트림 분석을 위한 완벽한 도구입니다.
Leica는 시료가 아니라 레이저를 움직입니다. 그리고 Leica는 중력을 이용해 표본을 모읍니다. Leica의 LMD 시스템이 완벽하게 절개되고 오염되지 않으며 바로 분석이 가능한 절개 표본을 제공할 수 있는 이유가 여기에 있습니다.
원하는 레이저 출력에 따라 선택하십시오.
Leica LMD6와 Leica LMD7의 차이는 레이저입니다. LMD7은 LMD6에 비해 더 높은 레이저 출력과 더 많은 레이저 컨트롤을 제공합니다. Leica LMD6은 뇌, 간, 신장 등 부드러운 조직을 해부하는 일반 실험에 완벽한 도구입니다. Leica LMD7은 크기나 모양에 상관없이 모든 조직의 해부에 적합한 제품입니다.
시료 대신 레이저 이동
펜 대신 종이를 움직여 종이 위에 이름을 써 보십시오. 매우 어려울 것입니다. Leica의 레이저 현미해부 시스템이 시료 대신 레이저를 이동하는 이유가 여기에 있습니다.
Leica Microsystems만이 고정밀 광학장치와 프리즘을 이용해 조직에서 원하는 절개 라인을 따라 레이저 빔을 움직입니다. 즉, Leica LMD는 조직까지 직각으로 절개해 깨끗하고 오염이 없는 절개가 가능합니다.
항상 최상의 정밀도 유지
- 최고의 정밀도와 속도로 절개 가능
- "이동 및 절개(Move and Cut)" 기능으로 실시간으로 바로 절개 가능
샘플에 맞는 레이저 조정
LMD7의 레이저 파워, 조리개, 속도, 헤드 전류 및 펄스 주파수 설정은 샘플의 요구 사항에 맞게 조정할 수 있습니다. 예를 들어, 식물의 두꺼운 부분은 높은 레이저 파워가 필요한 반면, 섬세하고 견고하지 않은 뉴런 주위를 절단하려면 낮은 파워의 레이저가 필요합니다. 얇은 섹션은 일반적으로 두꺼운 섹션보다 더 빠른 절단을 사용할 수 있습니다.
고급 절단 모드는 시료 해부 방법에 향상된 정밀도가 추가됩니다. 예를 들어 먼저 그린 다음 자르기(Draw + Cut) 하거나 마우스 클릭이나 PEN 화면으로 실시간으로 자르기(Move + Cut) 할 수 있습니다. Draw + Scan 모드는 유리에서 제거하기 위해 만들어진 반면 Laser Screw는 연속적으로 원을 그리면서 두꺼운 시편을 절단합니다. Final Pulse 모드를 사용하면 까다로운 해부를 수집 용기에 넣을 수 있습니다.
중력의 이용
다운스트림 분석은 오염이 없는 분리에 달려 있습니다. Leica LMD 시스템이 중력을 이용해 절개 표본을 모으는 이유가 여기에 있습니다. 특수한 레이저 기반 해부법으로 분리한 표본을 외부 접촉과 오염으로부터 보호할 수 있습니다.
1, 2, 3 – 오염되지 않은 시료!
- 관심 영역을 선택합니다.
- 절개할 영역을 따라 레이저를 이동합니다.
- 절개 표본이 페트리 접시로 떨어지면 100% 오염을 방지한 상태로 추가 분석을 수행할 수 있습니다.
진정한 장점은 중력은 항상 작용한다는 점입니다.
라이카 미세절단 현미경 시스템 소프트웨어
Leica LMD 소프트웨어는 샘플의 고품질 영역을 얻는 데 집중할 수 있도록 설정 선택 프로세스를 간소화하여 설계된 직관적인 응용 프로그램 소프트웨어입니다. 쉽게 선택하고, 분석하고, 시각화하세요!
- 레이저와 현미경을 조절
- 마우스 또는 펜 스크린으로 레이저 빔 안내
- 더 넓은 영역을 보기 위한 전체 영역 촬영
- 샘플을 자동으로 감지 및 절단
- 라이카 LMD 소프트웨어 연결:
- 자체 제작한 패턴 인식 소프트웨어 사용
- 슬라이드 스캐너와 같은 다른 장치에서 ROI 불러오기 기능
자동화 옵션
ADM(Auto Detection Mode)은 유사한 해부물을 대량으로 수집하는 데 도움이 되는 소프트웨어 모듈입니다. 관심 있는 영역을 둘러싸기만 하면 소프트웨어가 이를 다른 지역의 템플릿으로 사용합니다. 예를 들어, Proteomics 분석은 많은 양의 샘플을 캡처해야 하며 ADM은 100~1000개의 해부로 작업하는 실험실에 큰 이점을 제공했습니다.
자동 초점은 해부 과정을 거치기 전에 슬라이드에 분포된 수백 개의 지정된 ROI의 초점을 유지하는 데 사용할 수 있고 다른 시야 영역에서 최고의 퍼포먼스를 선보입니다. 또한 사용된 모든 수집 장치를 자동으로 검사하고 문서화할 수 있습니다.
체계적인 접근: 래스터 도구는 시야를 주어진 수의 영역으로 분리합니다. 이 기능을 사용하면 샘플을 체계적으로 해부하고 96well 플레이트와 같은 다양한 수집 장치로 해부물을 수집할 수 있습니다.
인공 지능을 위한 인터페이스
Aivia는 AI 기반의 이미지 시각화, 분석 및 해석 플랫폼입니다. 픽셀 분류기와 같은 AI 강화 도구와 함께 Aivia를 사용하면 레이저 미세 절개(LMD)에서 관심 영역(ROI)을 자동으로 정의할 수 있습니다. ROI는 Aivia에서 감지하여 미세 절개용 LMD 소프트웨어로 직접 가져올 수 있습니다.
Aivia 외에도 다른 외부 소프트웨어를 사용하여 ROI를 자동으로 감지할 수 있습니다. LMD 소프트웨어에는 ROI 정보가 포함된 XML 파일이 필요합니다.
높은 처리량 기능
더 많은 처리량이 필요하십니까? LMD 시스템은 다양한 종류의 스테이지로 구성할 수 있습니다. LMT350 울트라 스캐닝 스테이지는 그중 가장 빠르고 조용하며 정확한 탐색을 제공합니다.
LMT350은 0.2ml 튜브 캡에서 시작하여 8개 및 12개 캡 스트립을 거쳐 표준 96well 및 384well 용기*까지 수집 용기를 고정할 수 있습니다. 이를 통해 처리량이 많은 실험을 수행할 수 있습니다.
특별한 재료가 필요하지 않지만, 일반 마이크로플레이트를 사용하기 때문에 이러한 플레이트를 일반 PCR 기계에 직접 로드할 수 있습니다.
*최대 352개의 웰 지정 가능
소모품
A) 시료
라이카 마이크로시스템즈는 레이저 미세 절단을 위한 다양한 슬라이드 옵션을 제공합니다.
- 유전체학 및 전사체학에 모든 종류의 멤브레인 슬라이드 사용
- PET에는 연화제가 거의 없기 때문에 단백질체학 및 대사체학의 특정 응용 분야에 PET 슬라이드를 사용
- 멤브레인 없이 작업하려면 DIRECTOR 슬라이드를 선택
B) 수집
Leica LMD 시스템은 중력에 의해 해부물을 수집하기 때문에 표준 장치를 사용하여 수집할 수 있습니다. 실험실에 이미 있는 0.2 또는 0.5 ml PCR 튜브캡과 같은 일반적인 분자 생물학 실험에 필요한 소모품을 사용하기만 하면 됩니다. 수집 장치는 LMD Application을 위해 건조된 상태이거나 완충용액이나 배양용액을 채울 수 있습니다.
성공을 보장하는 대물렌즈
작업에 특화되고 최적화된 대물렌즈를 통해 최상의 절개 결과를 보장합니다. 19세기 설립 이후 광학장치의 개발과 제조가 Leica의 핵심 역량이었던 만큼, LMD 전용 대물렌즈인 SmartCut 시리즈는 신뢰할 수 있는 안정적인 성능을 제공합니다.
- 2.5x - 150x 배율의 건조 대물렌즈들 중에서 선택
- 특수한 150x SmartCut 대물렌즈를 사용한 고배율 및 고해상도 관찰
- 시료의 큰 부분을 한 조각으로 절개해 저배율 대물렌즈를 통해 넓은 시야로 관찰
- 350nm에 이르는 최고의 레이저 광 투과율을 제공하는 대물렌즈를 통한 조직, 뼈, 치아, 뇌, 식물, 염색체 및 생세포의 절개
Leica의 대물렌즈는 탁월한 이미징 성능을 제공합니다.
LCC – 생세포 절개 (Live Cell Cutting)
생세포를 사용한 실험에서는 일반적으로 도립 현미경을 사용합니다. Leica LMD 시스템이 정립 현미경에 기반을 두고 있지만, 생세포 절개 작업에서도 우수한 성능을 발휘합니다.
- 단일 세포, 군체 또는 세포 군집의 재배양, 복제 또는 분석을 위해 배양 중인 생세포 절개 가능
- LMD 시스템에 기후 챔버 장착 가능
- PEN 멤브레인이나 멀티 웰 Ibidi 슬라이드를 사용해 페트리 접시에서 세포 배양
- PEN 멤브레인, Ibidi 슬라이드, 재배양용 8 스트라이프생 튜브의 사용 여부에 상관없이 세포의 절개 표본을 페트리 접시로 수거하거나 분석을 위해 PCR 튜브 캡 같은 수거 장치에 수거 가능
콤비네이션(조합) 시스템: THUNDER Imaging을 사용하는 LMD 시스템
LMD6 및 LMD7 시스템은 THUNDER와 결합할 수 있습니다. THUNDER Imager 3D Tissue와 LMD 시스템은 동일합니다. 이 조합이 제공하는 장점은 다음과 같습니다:
- 하나의 시스템으로 다양한 작업을 수행할 수 있어 랩 공간 절약
- 제한 없이 LMD로 레이저 미세 절개
- 다색 및 3D(z스택)에서도 LAS X를 사용하여 선명한 THUNDER 형광 이미징 및 3D 뷰어의 시각화.