신뢰할 수 있는 타겟팅 정밀도

상관관계 워크플로의 경우, 이어서 진행되는 전자현미경 단계에서 형광 신호가 보이지 않기 때문에 극저온 광학 현미경에서 확인된 정확한 목표물(target) 좌표들을 되찾는 것이 중요합니다.

따라서 시스템 상호 운용성을 높이기 위해 오픈 액세스 좌표를 가진 STELLARIS 극저온 현미경에서 타겟팅이 수행됩니다.

사용하기 쉬운 LAS X Coral Cryo 소프트웨어 모듈은 이러한 요구 조건을 충족시키며, 나노미터 크기에 오픈된 형태의 좌표 마커들의 정확한 위치 지정을 할 수 있는 혁신적인 보간(interpolation)기반 3D 타겟팅을 특징으로 합니다. 랜드마크, 박막층, 비즈 표시를 위해서 다양한 기능을 제공하는 다양한 마커 유형도 사용할 수 있습니다.

LAS X Coral Cryo: x 및 y 방향으로 z-stack을 통과하는 단면을 사용한 3D에서 보간 기반 비드 포지셔닝(interpolation based positioning)입니다. 마커는 모든 관련 창에서 상호작용으로 이동할 수 있습니다.
LAS X Coral Cryo: x 및 y 방향으로 z-stack을 통과하는 단면을 사용한 3D에서 보간 기반 비드 포지셔닝(interpolation based positioning)입니다. 마커는 모든 관련 창에서 상호작용으로 이동할 수 있습니다.

당사의 극저온 전자 단층 촬영술 워크플로 솔루션

라이카의 전용 Coral Cryo 3D 극저온 전자 단층 촬영술 워크플로 시스템은 시료의 생존 능력과 품질 확인 그리고 무엇보다도 정밀하고 신뢰할 수 있는 3D 타겟팅 메커니즘을 보장합니다.

극저온 스테이지와 셔틀을 포함하는 STELLARIS Cryo는 최첨단 CryoET를 겨냥하는 소프트웨어(LAS X Coral Cryo)와 함께 사용될 수 있을 뿐만 아니라 cryo FIB 또는 VCT 스테이지와의 원활한 통합과 운반 옵션을 이용할 수 있도록 설계되었습니다.

원활한 시료 준비 작업을 통해 생산성을 향상하십시오.

Coral Cryo 3D 극저온 전자 단층촬영 워크플로우 솔루션
Coral Cryo 3D 극저온 전자 단층촬영 워크플로우 솔루션

LIGHTNING을 통한 시료 정보의 극대화

 Power HyD 검출기제품군, 최적화된 빔 경로,  백색광 레이저 (White Light Lasers, WLL)간의 시너지 효과를 통해 보다 정확하고 신뢰할 수 있는 데이터를 얻을 수 있습니다.

미세 구조들과 그 외에 단순히 보이지 않는 이미지 정보들의 세부 사항들을 드러내는 독특한 LIGHTNING 검출 개념을 통해 유리화된 시료에서 추출한 정보를 최대화하고 과학적 질문에 대한 심층적인 답변을 얻을 수 있습니다.

이를 통해 전자현미경 작업 흐름에서 다음 단계를 위한 관심 구조를 보다 더 정확하게 타겟팅할 수 있게 합니다.

LIGHTNING이 아님 LIGHTNING Cryo

신뢰할 수 있는 성능

극저온 전자현미경에서, 워크플로 전반에 걸쳐 얼음 두께를 모니터링해야하며, 일찍 확인하고 평가할 수록 더 좋습니다. 얼음이 너무 두꺼우면 밀링 단계에서 문제를 일으킬 수 있으며, 그렇다고 너무 얇으면 시료의 안정성에 영향을 미칠 수 있습니다.

STELLARIS Cryo는 얼음 확인을 위해, 빠른 카메라 개요와 3D에서 얼음 두께를 결정하기 위한 공초점 반사 모드 등 두 가지 모드를 제공합니다. 

Cryo CLEM 대물 렌즈 HC PL APO 50x/0.90는 극저온 광학 현미경의 특정한 요구를 충족하도록 개발되었으며 액침 없이도 초고해상도의 장점을 제공합니다.

Hoechst(파란색, 핵), Mitotracker Green(녹색, 미토콘드리아), Bodipy(빨간색, 지질 방울), beads(자홍색, 1µm), Reflection(흰색)을 나타내는 HeLa 세포. Scale bar 10μm: 세포 제공: Ievgeniia Zagoriy, Mahamid Group, EMBL Heidelberg, Germany
Hoechst(파란색, 핵), Mitotracker Green(녹색, 미토콘드리아), Bodipy(빨간색, 지질 방울), beads(자홍색, 1µm), Reflection(흰색)을 나타내는 HeLa 세포. Scale bar 10μm: 세포 제공: Ievgeniia Zagoriy, Mahamid Group, EMBL Heidelberg, Germany

더 많은 것을 발견할 수 있는 가능성

STELLARIS Cryo에 포함된 당사의 특별한 TauSense 기술을 통해 모든 시료에서 추가적인 막 정보를 추출하고 연구의 과학적 영향력을 높일 수 있습니다.

스펙트럼 색상 정보 외에도 광자들의 평균 도착시간(arrival time)을 시각화할 수 있습니다. 이것은 다른 형광 수명(TauContrast)만으로도 숨겨진 구성 요소를 드러내는 데 사용될 수 있습니다.

Coral Cryo과 같은 극저온 워크플로 중 낮은 온도때문에, 형광(fluorophores)의 방출 및 여기 기간이 수렴합니다. TauSense를 사용하면 평균 광학 도착 시간이 다르기 때문에, 겹치는 형광(fluorophores)를 분리할 수 있습니다.

TauSense 이미징 도구로 검사한 규조류. TauSeparation: 왼쪽 이미지: 엽록체의 자가형광(autofluorescence)을 획득한 수명 구성 요소 1, 광자(photons)의 평균 도착 시간 1ns. 가운데 이미지: 액틴 필라멘트의 투명한 LifeAct-GFP 신호를 보여주는 수명 구성 요소 2, 평균 도착 시간 2.7ns. TauContrast를 보여주는 오른쪽 이미지: 조회 표에는 색상별 도착 시간이 표시됩니다: 파란색은 짧은 도착 시간, 빨간색과 노란색은 긴 도착 시간. 샘플 제공: Nicole Poulsen, B cube, TU Dresden, Germany.
TauSense 이미징 도구로 검사한 규조류. TauSeparation: 왼쪽 이미지: 엽록체의 자가형광(autofluorescence)을 획득한 수명 구성 요소 1, 광자(photons)의 평균 도착 시간 1ns. 가운데 이미지: 액틴 필라멘트의 투명한 LifeAct-GFP 신호를 보여주는 수명 구성 요소 2, 평균 도착 시간 2.7ns. TauContrast를 보여주는 오른쪽 이미지: 조회 표에는 색상별 도착 시간이 표시됩니다: 파란색은 짧은 도착 시간, 빨간색과 노란색은 긴 도착 시간. 샘플 제공: Nicole Poulsen, B cube, TU Dresden, Germany.

실험 생산성

모든 극저온 작업을 수행하면서 시료를 유리화한 즉시, 시료는 완전히 수분을 제거하고 극저온 상태를 유지해야 합니다.

극저온 스테이지 및 셔틀을 포함하는 당사의 혁신적인 Cryo Microscopy Kit를 사용하여 안전하고 직관적인 샘플 로딩, 직접적인 전달 작업이 가능하며, 시료를 항상 안전한 극저온 상태로 유지합니다.

극저온 스테이지를 통해 안정적인 극저온 상태에서 광학 현미경 작업을 수행할 수 있으며, 주변 대기에 대해 가스 질소의 일관된 광과압을 유지함으로써 탁월한 해상도의 3D 영상촬영에 필요한 이동이 가능합니다.

시료에 대한 더 안전한 로딩을 보장하기 위해 연구자는 이동 셔틀을 장착한 커버 박스(옵션)를 사용하여 모든 조건에서 안전한 로딩이 가능하고, 추가적인 프로세스 제어 기능을 활용하고, 안전한 로딩 시간을 확장할 수 있습니다.

공초점 현미경 STELLARIS Cryo
공초점 현미경 STELLARIS Cryo

세포 내 타켓을 3D로 분석하고 확인

상관 관계(correlative)의 워크플로우에서는 그 다음 전자현미경 단계에서 형광 신호가 보이지 않기 때문에 극저온 현미경에서 식별된 정확한 타겟 좌표를 다시 찾는 것이 중요합니다.

저희 LAS X Coral Cryo 소프트웨어는 나노미터 단위로 오픈 포맷 좌표 마커를 정밀하게 배치할 수 있게 해줍니다. 랜드마크, 라멜라 및 비드의 마킹을 위해 다양한 기능을 제공하는 다양한 마커 타입도 사용할 수 있습니다. LAS X Coral Cryo 소프트웨어가 포함된 STELLARIS Cryo는 모든 EM 소프트웨어로 가져올 수 있는 오픈 파일 형식으로 3D 공초점 데이터를 제공합니다: TIFF, LIFE, ome.tiff.

LAS X Coral Cryo: x 및 y 방향으로 z-stack을 통과하는 단면을 사용한 보간 기반 3D 타겟팅입니다. 마커는 모든 관련 창에서 상호작용으로 이동할 수 있습니다.
LAS X Coral Cryo: x 및 y 방향으로 z-stack을 통과하는 단면을 사용한 보간 기반 3D 타겟팅입니다. 마커는 모든 관련 창에서 상호작용으로 이동할 수 있습니다.

STELLARIS Cryo 공초점과 cryo- FIB 사이의 처리 단계를 줄입니다.

전용 Coral Cryo 극저온 전자 단층촬영 워크플로우는 샘플 생존성, 품질 체크, 그리고 무엇보다도 정밀하고 신뢰할 수 있는 3D 이미징을 보장합니다.

극저온 스테이지와 셔틀을 포함하고 있는 STELLARIS Cryo는, LAS X Coral Cryo 소프트웨어 뿐만 아니라, cryo-FIB 또는 VCT스테이지로 여러가지 원활한 통합 및 운반 옵션과 함께 사용할 수 있도록 설계되었습니다. 새로운 극저온 스테이지는 극저온이 아닌 응용분야로 작업 범위를 늘려, 공초점 이미징으로 STELLARIS의 사용성을 확장시킵니다.

모든 구성품이 호환되기 때문에 시료를 운반하는 동안 안전하게 유지키실 수 있습니다.

Coral Cryo 3D 극저온 전자 단층촬영 워크플로우 솔루션
Coral Cryo 3D 극저온 전자 단층촬영 워크플로우 솔루션

차세대 STELLARIS

모든 샘플에서 세부 사항을 관찰하고, 가장 희미한 신호를 포착하며, 스펙트럼 전반에 걸쳐 더 정확하고 신뢰할 수 있는 데이터를 수집합니다.

형광 수명 기반 정보를 사용한 실험에 추가적인 관점을 포함시킴으로써 획기적인 발견이 가능해집니다.

간소화된 설정과 탐색으로 생산성이 향상됩니다.

STELLARIS 공초점 플랫폼에 대해 자세히 알아보십시오.

투명한 애기장대 뿌리 샘플의 평균 도착 시간 이미지(TauContrast). 제공: W. Busch, Salk Institute, La Jolla, CA, USA.
투명한 애기장대 뿌리 샘플의 평균 도착 시간 이미지(TauContrast). 제공: W. Busch, Salk Institute, La Jolla, CA, USA.

고급 이미징을 통해 타겟과 배경을 구분

Power HyD 검출기 제품군, 최적화된 빔 경로, 차세대 백색광 레이저 간의 완벽한 시너지가 탁월한 이미지 성능을 제공합니다. 미량의 표지(label)와 이벤트를 이미징할 때에도 보다 밝은 신호, 보다 높은 콘트라스트, 향상된 감도로 더욱 선명하고 더욱 자세한 결과를 얻을 수 있습니다.

유리화된 시료에서 추출한 정보를 극대화하고 이미지 정보에서 미세 구조들과 세부 사항을 드러내 보이는 적응형 추출 프로세스인 특별한 LIGHTNING 검출 개념을 통해 과학적 질문에 대한 심층적인 답변을 얻어 보십시오.

관심 있는 3D 구조를 보다 정확하게 겨냥할 수 있습니다: 실온과 극저온 조건에서, 전자현미경 워크플로우의 다음 단계를 준비하십시오.

EM grid 위에 동결 낙하 고정된(plunge frozen) 포유류 세포. 세포 기관의 염색 상세: Tag BFP(핵, 파란색), Cerulean(막, 녹색), hmAzami-Green(미토콘드리아, 주황색), mCitrine(골지, 빨간색), mCherry(ER, 자홍색), reflection(그리드 및 탄소 막 시각화, 흰색). 샘플 제공: Dr. Oleg Sitsel, Dr. Oleg Sitsel, Max Planck Institute for Molecular Physiology, Dortmund, Germany. Scale bars xy: 10 µm z: 1 µm.
EM grid 위에 동결 낙하 고정된(plunge frozen) 포유류 세포. 세포 기관의 염색 상세: Tag BFP(핵, 파란색), Cerulean(막, 녹색), hmAzami-Green(미토콘드리아, 주황색), mCitrine(골지, 빨간색), mCherry(ER, 자홍색), reflection(그리드 및 탄소 막 시각화, 흰색). 샘플 제공: Dr. Oleg Sitsel, Dr. Oleg Sitsel, Max Planck Institute for Molecular Physiology, Dortmund, Germany. Scale bars xy: 10 µm z: 1 µm.

신뢰할 수 있는 성능

극저온 전자 현미경 검사의 경우, 워크플로우 전반에서 얼음 두께를 모니터링하는 것이 매우 중요한데, 가급적 빨리 확인하고 평가할수록 실험에 도움이 됩니다. 얼음이 너무 두꺼우면 밀링 단계에서 문제를 일으킬 수 있고 너무 얇아도 샘플의 안정성에 영향을 줄 수 있기 때문입니다.

STELLARIS Cryo는 이 얼음 두께 체크를 위해 두 가지 모드로 제공합니다: 빠른 카메라 오버뷰와 3D에서 얼음 두께를 측정하는 공초점 반사 모드입니다.

Cyro CLEM 대물렌즈 HC PL APO 50x/0.90은 극저온 현미경의 요구를 충족시키기 위해 특별히 개발되었으며, 액체 침지(liquid immersion)없이도 초고해상도의 장점을 제공합니다.

Hoechst(파란색, 핵), Mitotracker Green(녹색, 미토콘드리아), Bodipy(빨간색, 지질 방울), beads(자홍색, 1µm), Reflection(흰색)를 나타내는 포유류 세포. Scale bar 10μm: 세포 제공: Ievgeniia Zagoriy, Mahamid Group, EMBL Heidelberg, Germany
Hoechst(파란색, 핵), Mitotracker Green(녹색, 미토콘드리아), Bodipy(빨간색, 지질 방울), beads(자홍색, 1µm), Reflection(흰색)를 나타내는 포유류 세포. Scale bar 10μm: 세포 제공: Ievgeniia Zagoriy, Mahamid Group, EMBL Heidelberg, Germany

수명 기반 정보를 사용하여 원치 않는 신호를 제거합니다

STELLARIS는 모든 실험에서 추가적인 차원의 정보를 제공할 수 있도록 공초점 현미경을 재탄생시켰습니다. TauSense를 통해 혁신적이고 새로운 시간 기반 도구를 간편하게 사용해보세요. 몇 번의 클릭만으로 원하지 않는 신호를 제거하여 이미지에서 더 자세한 정보를 확인하고, 단일 실험에서 더 많은 라벨을 확인하고, 스펙트럼이 중복되는 형광단을 구분하며, 수명 기반 정보의 힘을 사용하여 국지적인 기능과 마이크로 환경의 변화를 탐구할 수 있습니다. TauSense를 통해 STELLARIS가 연구에 새로운 가능성을 열어드립니다.

STELLARIS Cryo에서 TauSense를 사용하면 형광 수명의 차이를 활용하여 중첩된 형광(fluorosphores)을 분리할 수 있습니다. TauSense는 그리드 반사와 같은 원치 않는 신호 전달을 식별하는 데도 사용할 수 있습니다.

TauSense 이미징 도구로 검사한 규조류. TauSeparation: 왼쪽 이미지: 엽록체의 자가형광(autofluorescence)을 획득한 수명 구성 요소 1, 광자(photons)의 평균 도착 시간 1ns. 가운데 이미지: 액틴 필라멘트의 투명한 LifeAct-GFP 신호를 보여주는 수명 구성 요소 2, 평균 도착 시간 2.7ns. TauContrast를 보여주는 오른쪽 이미지: 조회 표에는 색상별 도착 시간이 표시됩니다: 파란색은 짧은 도착 시간, 빨간색과 노란색은 긴 도착 시간. 샘플 제공: Nicole Poulsen, B cube, TU Dresden, Germany.
TauSense 이미징 도구로 검사한 규조류. TauSeparation: 왼쪽 이미지: 엽록체의 자가형광(autofluorescence)을 획득한 수명 구성 요소 1, 광자(photons)의 평균 도착 시간 1ns. 가운데 이미지: 액틴 필라멘트의 투명한 LifeAct-GFP 신호를 보여주는 수명 구성 요소 2, 평균 도착 시간 2.7ns. TauContrast를 보여주는 오른쪽 이미지: 조회 표에는 색상별 도착 시간이 표시됩니다: 파란색은 짧은 도착 시간, 빨간색과 노란색은 긴 도착 시간. 샘플 제공: Nicole Poulsen, B cube, TU Dresden, Germany.

이미징 중 오염 최소화

극저온 워크플로우 전반에 걸쳐, 샘플은 유리화 직후 제습 및 극저온 조건 하에서 유지해야 합니다. 극저온 스테이지와 셔틀이 포함된 Cryo Microscopy Kit는 샘플을 최적의 극저온 조건에서 유지하면서 안전하고 직관적인 샘플 로딩과 간단한 이동을 보장합니다.

극저온 스테이지는 주변 대기에 대한 기체 질소의 과압을 일정하게 유지하여 안정적인 극저온 조건에서 광학 현미경 검사를 수행할 수 있습니다. 이 스테이지는 고해상도 3D 이미징에 필요한 모든 동작을 지원합니다.

로딩 과정의 안전성을 높이기 위해, 이동 셔틀을 넣어 두는 커버 박스(옵션)를 사용할 수 있습니다. 이 커버 박스는 모든 조건에서 안전한 로딩을 보장하고, 추가적인 프로세스 제어를 제공하며, 안전한 로딩 시간대를 연장합니다.

STELLARIS Cryo 공초점 현미경
STELLARIS Cryo 공초점 현미경
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