Microscópios de fluorescência
Os microscópios de fluorescência usados em aplicações de pesquisa são baseados em um conjunto de filtros ópticos:
- um filtro de excitação
- um divisor de feixe dicroico e
- um filtro de emissão
Os filtros geralmente são conectados em conjunto em um cubo de filtragem (microscópios compostos) ou em um suporte plano (principalmente estereomicroscópios).
Enquanto o filtro de excitação seleciona os comprimentos de onda para excitar um marcador específico dentro da amostra, o filtro de emissão serve como um tipo de controle de qualidade, permitindo a passagem apenas dos comprimentos de onda de interesse emitidos pelo fluoróforo. O objetivo do espelho dicroico é refletir a luz na banda de excitação e transmitir luz na banda de emissão, permitindo a iluminação clássica da luz incidente de epifluorescência.
Estereomicroscópios de fluorescência
Os estereomicroscópios de fluorescência da Leica Microsystems usam a tecnologiaTripleBeam, um (terceiro) caminho de luz separado para iluminação de fluorescência da amostra sem um espelho dicroico.
Portanto, é necessário um filtro de excitação para o caminho do feixe de iluminação e dois filtros de emissão, um para cada caminho de luz de observação.
Câmeras para microscopia de fluorescência
Para adquirir imagens de fluorescência, é necessário utilizar a câmera de fluorescência CCD ou sCMOS apropriada.
A Leica Microsystems oferece câmeras de fluorescência dedicadas para todas as necessidades de aplicação.
Cada câmera propicia a correspondência perfeita entre sensibilidade e qualidade das imagens para garantir resultados incríveis.
Software para microscopia de fluorescência
A prática configuração e controle dos experimentos estão se tornando cada vez mais importantes na microscopia de fluorescência.
A plataforma de software dedicada Leica Application Suite (LAS) X facilita a configuração até mesmo de experimentos complexos.
O LAS X orienta você desde a configuração até a análise dos dados da aquisição de imagens. Desde experimentos fáceis em vários canais até análises 3D complexas, o LAS X é a plataforma de software perfeita.
Sobre a microscopia de fluorescência
A microscopia de fluorescência se tornou o fenômeno físico mais importante na biologia e medicina modernas.
Após um início lento, a possibilidade de marcação fluorescente alavancou essa aplicação no início da década de 30 do século passado. Por volta de 1950, um segundo estágio foi iniciado com a invenção da marcação de imunofluorescência.
A aquisição de imagens funcionais, com destaque para sondas de Ca++, libertou a metodologia das limitações de apenas fornecer imagens morfológicas e estruturais. A possibilidade de criar materiais vivos com proteínas fluorescentes revolucionou a microscopia de fluorescência para um inesperado e extenso terceiro estágio.
Atualmente, novos métodos que utilizam proteínas fluorescentes estão surgindo semanalmente. E, por último, mas não menos importante: todos os modos de aquisição de imagens de super resolução são baseados em fluorescência.
