Microscópios de campo escuro
Ao trabalhar com um microscópio, o método de contraste mais usado é o campo claro. No entanto, o campo claro geralmente fornece apenas uma imagem de baixo contraste de muitos espécimes biológicos transparentes. Esse também pode ser o caso de muitas amostras de materiais opacos transparentes ou refletores. Em imagens de baixo contraste, poucos detalhes são distinguidos. O contraste da microscopia de campo claro para espécimes biológicos pode ser melhorado usando-se colorações seletivas, mas, muitas vezes, elas são tóxicas para as células vivas. Um microscópio de campo escuro oferece uma forma para visualizar estruturas de muitos tipos de espécimes biológicos com maior contraste, sem a necessidade de colorações. A microscopia de campo escuro também pode aumentar o contraste ao gerar imagens de amostras de materiais. O método de contraste de campo escuro explora a difração ou a dispersão de luz a partir de estruturas de uma amostra biológica ou as características não uniformes de uma amostra de material.
Os microscópios de campo escuro da Leica são úteis para o estudo de células ou tecidos em uma variedade de aplicações de ciências da vida e forenses. A microscopia de campo escuro também pode ser útil para aplicações de materiais e ciências da terra.
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O que é o campo escuro?
O termo campo escuro refere-se a uma técnica de contraste óptico para a microscopia, que torna visíveis as estruturas sem coloração das células de espécimes biológicos. As estruturas celulares que parecem transparentes com a iluminação de campo claro podem ser visualizadas com melhor contraste e detalhe usando o campo escuro. Adicionalmente, as características não uniformes de materiais transparentes ou sobre a superfície de amostras de materiais opacos podem ser mais facilmente observadas em campo escuro em comparação ao campo claro. Estruturas na célula ou características do material dispersam a luz que interage com elas, enquanto áreas uniformes permitem que a luz passe sem dispersão. Ao usar a microscopia de campo escuro, as estruturas celulares ou as características do material parecem mais brilhantes e o fundo uniforme da célula ou do material parece mais escuro.
Quais são os usos de um microscópio de campo escuro? Que tipo de amostras é possível visualizar?
Muitas vezes, amostras biológicas e tecidos, quer fixados ou vivos, são observados com um microscópio de campo escuro. Além disso, várias amostras de materiais e geológicas podem ser observadas com a técnica de campo escuro. Para exemplos, consulte os artigos: Trabalhe com mais eficiência na análise biológica com o microscópio estéreo. Zebrafish, Medaka, and Xenopus" & "Como adaptar a análise de tamanho de grão de ligas metálicas às suas necessidades"
A luz em formato de anel que passa pela abertura é focada pelo condensador no espécime biológico ou amostra de material a serem observados. Porções da luz em formato de anel são difratadas ou dispersas pelas estruturas do espécime ou pelas características da amostra. A luz difratada entra na objetiva. Em contraste, a porção da luz em formato de anel que passa diretamente através do espécime não desviado ou que é refletida pela amostra sem dispersão não será coletada pela objetiva. A luz dispersa pelas estruturas do espécime ou pelas características da amostra parecerá mais brilhante do que as áreas de fundo do espécime ou amostra, onde não há dispersão de luz.
Para obter mais informações, consulte o artigo: "Metalografia - uma introdução"
Perguntas frequentes sobre microscópios de campo escuro
Um microscópio de campo escuro é similar a um microscópio de campo claro convencional, sendo que a única diferença é que ele usa uma abertura anular na frente da fonte de luz. A luz da iluminação em campo escuro colide contra o espécime ou amostra em um alto ângulo de incidência, transmitindo através da amostra ou refletindo de sua superfície, e em seguida passa através da lente objetiva e finalmente através das oculares ou atinge o sensor da câmera. A iluminação em campo escuro faz com que áreas uniformes de amostras transparentes ou superfícies planas de amostras opacas pareçam escuras, pois a maior parte da luz em um alto ângulo incidente não passa pela objetiva. Normalmente, existem características em amostras transparentes ou na superfície de amostras opacas que dispersam a luz. Por esse motivo, as imagens da microscopia de campo escuro mostram um fundo escuro com áreas mais brilhantes correspondentes a essas características, porque a luz que elas dispersam entra na objetiva.
Sim, um espécime biológico vivo, como células ou um organismo, pode ser observado facilmente com um microscópio de campo escuro.
Sim, um microscópio de campo escuro pode ser equipado com uma câmera para gravar imagens observadas com o método de contraste. Também pode ser equipado com outros acessórios. Para obter mais informações, entre em contato com o representante Leica de sua região.
