Microscópios DIC
A maioria das pessoas usa iluminação de campo claro ao usar um microscópio. Infelizmente, ele normalmente oferece apenas uma imagem de baixo contraste de muitos espécimes biológicos, em que poucos detalhes podem ser distinguidos. Manchas seletivas podem ser usadas para melhorar o contraste com o campo claro, mas há o risco de que as manchas possam ser tóxicas para as células vivas. Com a microscopia DIC, onde DIC significa contraste de interferência diferencial, nenhuma mancha é necessária para ver as estruturas de muitos tipos de espécimes biológicos com maior contraste, em comparação com o campo claro. O método de contraste explora a luz polarizada e as diferenças na espessura ou densidade óptica do espécime que levam a um deslocamento de fase da luz que passa através dele.
O DIC é oferecido com microscópios específicos da Leica. Pode ser útil para a observação de células ou tecidos em uma variedade de aplicações de ciências da vida ou forenses. A microscopia DIC também pode ser útil para certos materiais e aplicações minerais.
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O que é microscopia DIC e para que ela é usada?
DIC é o contraste de interferência diferencial, uma técnica de contraste óptico para microscopia que permite que estruturas não coloridas nas células de espécimes biológicos sejam observadas com contraste e resolução adequados. Também pode ajudar a visualizar pequenas diferenças de altura nas superfícies dos materiais. Somente a luz polarizada é usada para iluminar o espécime. A luz polarizada é dispersa em dois raios de luz distintos com um plano ortogonal de polarização. À medida que os raios experimentam diferentes refrações ou dispersões no espécime, diferentes deslocamentos de fase ocorrem. Quando esses raios de luz se unem novamente, eles interferem e se tornam polarizados de maneira elíptica. Essa polarização pode ser alterada para uma mudança de amplitude por meio de um analisador. Mudanças de fase que correspondem a diferenças tão pequenas quanto 1/1000 de um comprimento de onda (quando detectadas com um sensor de câmera) podem ser observadas nas imagens do DIC. As imagens de microscopia DIC são semelhantes a um relevo e parecem ter uma sombra.
Como configurar a microscopia DIC?
Um microscópio DIC oferece microscopia de campo amplo e tem um filtro de polarização e prisma Wollaston entre a fonte de luz e a lente do condensador e também entre a lente objetiva e o sensor da câmera ou as oculares. Para obter mais informações sobre como ele é configurado, consulte os artigos: Contraste de interferência diferencial (DIC) e Metalografia
A luz de uma fonte passa por um filtro e se torna polarizada a 45°. Após passar através de um prisma Wollaston, a luz é separada em componentes polarizados perpendiculares onde um é 0° e o outro é polarizado a 90°. A lente do condensador foca a luz do espécime, que é iluminada por 2 raios paralelos coerentes com polarização diferente. Os raios sofrem diferentes comprimentos de caminho óptico, já que pode haver diferenças na espessura ou no índice de refração ao longo do caminho em que eles passam através do espécime.
O resultado é um deslocamento de fase de um raio em comparação com o outro. Depois de passar pela objetiva e por outro prisma Wollaston, a luz perpendicularmente polarizada é recombinada para se tornar uma que seja polarizada a 135°. Dependendo das diferenças nos comprimentos do caminho óptico, a interferência dos dois raios resulta em interferência construtiva (clareamento) ou destrutiva (escurecimento), e as estruturas antes dificilmente visíveis com campo claro, se tornam agora observáveis com o DIC.
Por fim, a luz transmitida diretamente, que não sofreu nenhuma mudança de fase, é removida pelo filtro de polarização (também chamado de analisador), que permite que apenas a luz polarizada a 135° passe. Para obter mais detalhes, consulte o artigo: Contraste de interferência diferencial (DIC)
Perguntas frequentes sobre microscópios DIC
Um microscópio DIC é semelhante a um microscópio de campo claro convencional, exceto que ele usa um filtro de polarização e prisma de Wollaston entre a fonte de luz e a lente do condensador e também entre a objetiva e o sensor da câmera ou as oculares. Para obter mais informações, consulte os artigos: Contraste de interferência diferencial (DIC) e Metalografia
No início da década de 1950, Georges Nomarski inventou a técnica de contraste de microscopia chamada de contraste de interferência diferencial ou DIC. Atualmente, ela ainda é uma técnica amplamente utilizada. Para obter mais detalhes, consulte os artigos: Uma breve história da microscopia de luz e Contraste de Interferência Diferencial (DIC)
Sim, um microscópio DIC pode ser equipado com uma câmera para gravar imagens DIC observadas com o método de contraste.
