Lado do hospedeiro do processo de infecção viral
Para a pesquisa de vírus, algumas vezes são usados organismos-modelo; no entanto, eles não imitam bem a morfologia do hospedeiro humano. Assim, mais frequentemente, os pesquisadores recorrem a estudos de tecidos humanos, biópsias ou culturas celulares.
Modelos de infecção ex vivo podem ser gerados a partir de modelos de tecidos, biópsias ou animais. Esses modelos podem ser investigados com a ajuda dos estereomicroscópios da Leica.
Culturas celulares, esferóides e organóides podem ser monitorados com a ajuda dos microscópios widefield (compostos) da Leica.
Outras investigações iniciais de modelos de infecção, culturas celulares 2D ou 3D são obtidas com microscópios de fluorescência mais sofisticados da Leica, como os THUNDER Imagers.
Análises genéticas downstream mais confiáveis podem ser realizadas com a microdissecção a laser da Leica Microsystems, a qual isola células específicas do tecido circundante.
Exemplos de aplicações de vírus estudados com as soluções da Leica são fornecidos nesta nota de aplicação (Microscopy in Virology).
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Aquisição de imagens de fluorescência de alta resolução para a pesquisa de vírus
A microscopia de alta resolução é um trunfo para estudos de doenças infecciosas, pois permite rastrear vírus ou patógenos causadores. Combinada com a marcação fluorescente de componentes celulares ou virais, permite sondar diversos aspectos de processos infecciosos.
Assim, tanto a microscopia de fluorescência confocal de varredura a laser quanto a fluorescência por reflexão interna total (TIRF) obtendo super resolução, são instrumentos preferenciais para a pesquisa viral.
Técnicas de microscopia avançada, como a microscopia multifotônica e de light sheet, podem oferecer acesso a eventos de infecção ocorrendo sob diferentes contextos, como seções de tecido, modelos de animais e modelos de infecção 2D, como organoides.
Os microscópios da Leica, que oferecem a você benefícios para o estudo de espécimes 3D relacionados à pesquisa de vírus, incluem a plataforma confocal STELLARIS e soluções TIRF.
Imagem e diagrama adaptados de Coomer et al. PLOS Pathogen (2020) 16(2): e1008359, DOI: 10.1371/journal.ppat.1008359
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Ultraestrutura de vírus
Para a avaliação da ultraestrutura de vírus, é necessária uma resolução que se aproxime de 1 nm. Atualmente, essa resolução só pode ser atingida com a microscopia eletrônica. A EM criogênica pode atingir até mesmo uma resolução subnanométrica.
A resolução ultraestrutural permite que você realmente veja a interação entre o hospedeiro e o vírus na nanoescala, assim como confirme os resultados de diferentes tecnologias analíticas e identifique locais-alvo de medicamentos potenciais. Além disso, ligantes ou pequenas moléculas de receptores de superfícies celulares, visados durante interações de partículas virais, são essenciais para a criação de vacinas e inibidores de entrada viral orientados para estruturas.
Para a EM convencional e criogênica, a preparação de amostras é crucial. Ela exige equipamentos e conhecimento especializado, que a Leica Microsystems oferece a você por meio de um extenso portfólio para a preparação de amostras EM, bem como a orientação de especialistas da Leica.
