Intrazelluläre Ziele in 3D auflösen und identifizieren

Bei korrelativen Arbeitsabläufen ist es entscheidend, die genauen Zielkoordinaten, die im Kryomikroskop identifiziert wurden, abzurufen, da Fluoreszenzsignale in den nachfolgenden Schritten des Elektronenmikroskops nicht sichtbar sind.

Unsere Software LAS X Coral Cryo ermöglicht die präzise Positionierung von Koordinatenmarkern im offenen Format im Nanometerbereich. Verschiedene Markertypen für die unterschiedliche Funktionen stehen zur Verfügung und erlauben die Kennzeichnung von Orientierungs-, Lamellen- und Beads. STELLARIS Cryo mit LAS X Coral Cryo Software liefert 3D-Konfokaldaten in offenen Dateiformaten, die in jede EM-Software importiert werden können: TIFF, LIFE, ome.tiff.

LAS X Coral Cryo: Interpolationsbasiertes Targeting in 3D unter Verwendung von Schnitten durch den Z-Stack in x- und y-Richtung. Die Marker können interaktiv in allen relevanten Fenstern verschoben werden.
LAS X Coral Cryo: Interpolationsbasiertes Targeting in 3D unter Verwendung von Schnitten durch den Z-Stack in x- und y-Richtung. Die Marker können interaktiv in allen relevanten Fenstern verschoben werden.

Reduzieren Sie die Anzahl der Arbeitsschritte zwischen STELLARIS Cryo konfokal und Cryo-FIB.

Die speziellen Coral Cryo Lösungen für den Kryo-Elektronentomographie-Workflow gewährleisten die Lebensfähigkeit von Proben, zuverlässige Qualitätskontrollen und vor allem eine präzise und zuverlässige 3D-Bildgebung.

STELLARIS Cryo, einschließlich Kryo-Probenbühne und Shuttle, ist für die Verwendung in Verbindung mit der Software LAS X Coral Cryo sowie einer Vielzahl von nahtlosen Integrations- und Transferoptionen zu Cryo-FIB- oder VCT-Tischen ausgelegt. Der Kryo-Tisch vergrößert den Arbeitsbereich bei Nicht-Kryoanwendungen und erweitert die Nutzbarkeit von STELLARIS für die konfokale Bildgebung.

Sie können die Probe während des Transfers sicher aufbewahren, da alle Komponenten kompatibel sind.

Coral Cryo 3D Kryo-Elektronentomographie-Workflow-Lösung
Coral Cryo 3D Kryo-Elektronentomographie-Workflow-Lösung

STELLARIS der nächsten Generation

Beobachten Sie feinere Details in jeder Probe, erfassen Sie die schwächsten Signale und gewinnen Sie präzisere und zuverlässigere Daten über das gesamte Spektrum hinweg.

Bahnbrechende Entdeckungen werden möglich, indem eine zusätzliche Dimension in Ihre Experimente mit fluoreszenzlebensdauerbasierten Informationen integriert wird.

Vereinfachte Einrichtung und Navigation erhöhen die Produktivität.

Erfahren Sie mehr über die STELLARIS Plattform für konfokale Mikroskopie.

Bild von gereinigten Arabidopsis-Thaliana-Wurzelproben mit durchschnittlicher Ankunftszeit (TauContrast). Mit freundlicher Genehmigung von: W. Busch, Salk Institute, La Jolla, Kalifornien, USA.
Bild von gereinigten Arabidopsis-Thaliana-Wurzelproben mit durchschnittlicher Ankunftszeit (TauContrast). Mit freundlicher Genehmigung von: W. Busch, Salk Institute, La Jolla, Kalifornien, USA.

Unterscheiden Sie Objekte vom Hintergrund dank fortschrittlicher Bildgebung

Die perfekte Synergie zwischen unserer Power HyD-Detektorfamilie, dem vollständig optimierten Strahlengang und Weißlichtlasern der nächsten Generation liefert eine außergewöhnliche Bildgebungsleistung. Ihre Ergebnisse sind klarer, mit mehr Details durch hellere Signale, mehr Kontrast und erhöhte Empfindlichkeit – auch bei der Bildgebung von Labels und Events mit geringer Abundanz.

Maximieren Sie die Informationen, die Sie aus Ihrer verglasten Probe extrahieren, und erhalten Sie detaillierte Antworten auf wissenschaftliche Fragen mit dem einzigartigen LIGHTNING-Erkennungskonzept, einem adaptiven Extraktionsprozess, der feine Strukturen und Details in den Bildinformationen aufdeckt.

Dies ermöglicht Ihnen ein genaueres Targeting relevanter Strukturen: bei Raumtemperatur und unter kryogenen Bedingungen, zur Vorbereitung auf die nächsten Schritte in Ihrem EM-Mikroskopie-Workflow.

Säugetierzellen eintauchgefroren auf EM-Gitter. Zellorganellen gefärbt mit: Tag BFP (Nucleus, blau), Cerulean (Membranen, grün), hmAzami-Green (Mitochondrien, orange), mCitrine (Golgi, rot), mCherry (ER, magenta), Reflexion (Gitter- und Kohlenstoffschichtvisualisierung, weiß). Proben mit freundlicher Genehmigung: Dr. Oleg Sitsel, Max Planck Institut für Molekularphysiologie, Dortmund. Messskalen xy: 10 µm; z: 1 µm.
Säugetierzellen eintauchgefroren auf EM-Gitter. Zellorganellen gefärbt mit: Tag BFP (Nucleus, blau), Cerulean (Membranen, grün), hmAzami-Green (Mitochondrien, orange), mCitrine (Golgi, rot), mCherry (ER, magenta), Reflexion (Gitter- und Kohlenstoffschichtvisualisierung, weiß). Proben mit freundlicher Genehmigung: Dr. Oleg Sitsel, Max Planck Institut für Molekularphysiologie, Dortmund. Messskalen xy: 10 µm; z: 1 µm.

Leistung, auf die Sie sich verlassen können

Bei der Kryo-Elektronenmikroskopie muss die Eisdicke während des gesamten Workflows überwacht werden, und je früher sie überprüft und bewertet wird, desto besser. Wenn das Eis zu dick ist, kann es während des Fräsens zu Problemen kommen. Ist es zu dünn, kann dies die Stabilität der Probe beeinträchtigen.

STELLARIS Cryo bietet zwei Modi zur Überprüfung der Eisdicke: eine schnelle Kameraübersicht und einen konfokalen Reflexionsmodus, der die Eisdicke in 3D bestimmt.

Das Cryo CLEM-Objektiv HC PL APO 50x/0.90 wurde speziell entwickelt, um die Anforderungen der Kryo-Mikroskopie zu erfüllen und Ihnen die Vorteile einer Super-Resolution zu bieten, ohne dass ein Eintauchen in Flüssigkeiten erforderlich ist.

Säugetierzellen mit Hoechst (blau, Nucleus), Mitotracker Green (grün, Mitochondrien), Bodipy (rot, Lipidtröpfchen), Perlen (magenta, 1 μm), Reflexion (weiß). Maßstab 10 μm: Zellen freundlicherweise bereitgestellt von Ievgeniia Zagoriy, Mahamid Group, EMBL Heidelberg, Deutschland
Säugetierzellen mit Hoechst (blau, Nucleus), Mitotracker Green (grün, Mitochondrien), Bodipy (rot, Lipidtröpfchen), Perlen (magenta, 1 μm), Reflexion (weiß). Maßstab 10 μm: Zellen freundlicherweise bereitgestellt von Ievgeniia Zagoriy, Mahamid Group, EMBL Heidelberg, Deutschland

Entfernen unterwünschter Signale mithilfe von lebendauerbasierten Informationen

STELLARIS hat die konfokale Mikroskopie neu definiert, indem es bei jedem Experiment eine zusätzliche Dimension an Informationen bietet. Mit TauSense stellen wir Ihnen revolutionäre neue lebensdauerbasierte Tools zur Verfügung. Mit nur wenigen Klicks können Sie unerwünschte Signale entfernen, um mehr Details in Ihren Bildern zu zeigen, mehrere Labels in einem einzigen Experiment multiplexieren, Fluorophore mit überlappenden Spektren trennen und die Leistungsfähigkeit lebensdauerbasierter Informationen nutzen, um lokalisierte funktionelle und mikroumweltbezogene Veränderungen zu untersuchen. Mit TauSense eröffnet STELLARIS eine Welt voller neuer Möglichkeiten für Ihre Forschung.

Mit TauSense in STELLARIS Cryo können Sie mögliche Unterschiede in der Fluoreszenzlebensdauer ausnutzen, um überlappende Fluorophore zu trennen. Mit TauSense können auch unerwünschte Signalbeiträge wie z. B. Grid-Reflexionen identifiziert werden.

Diatomeen untersucht mit TauSense Bildgebungstools. TauSeparation: Bild links: Lebensdauerkomponente 1 Ausschneiden der Autofluoreszenz der Chloroplasten, durchschnittliche Ankunftszeit der Photonen 1 ns. Bild Mitte: Lebensdauerkomponente 2 zeigt das saubere LifeAct-GFP-Signal von Aktin-Filamenten, 2,7 ns durchschnittliche Ankunftszeit. Das rechte Bild zeigt TauContrast: Die Lookup-Tabelle zeigt die Ankunftszeiten farblich an: kurze Ankunftszeiten in blau, längere Ankunftszeiten in gelb bis rot. Proben mit freundlicher Genehmigung von Nicole Poulsen, B CUBE, TU Dresden, Deutschland.
Diatomeen untersucht mit TauSense Bildgebungstools. TauSeparation: Bild links: Lebensdauerkomponente 1 Ausschneiden der Autofluoreszenz der Chloroplasten, durchschnittliche Ankunftszeit der Photonen 1 ns. Bild Mitte: Lebensdauerkomponente 2 zeigt das saubere LifeAct-GFP-Signal von Aktin-Filamenten, 2,7 ns durchschnittliche Ankunftszeit. Das rechte Bild zeigt TauContrast: Die Lookup-Tabelle zeigt die Ankunftszeiten farblich an: kurze Ankunftszeiten in blau, längere Ankunftszeiten in gelb bis rot. Proben mit freundlicher Genehmigung von Nicole Poulsen, B CUBE, TU Dresden, Deutschland.

Minimierung der Kontamination während der Bildgebung

Während der gesamten Kryo-Workflows müssen die Proben unmittelbar nach der Vitrifikation unter entfeuchteten und kryogenen Bedingungen aufbewahrt werden. Das Kryomikroskopie-Kit, bestehend aus einer Kryo-Stage und einem Shuttle, gewährleistet eine sichere und intuitive Probenbeladung sowie einen einfachen Transfer, während die Probe unter optimalen Kryobedingungen gehalten wird.

Die Kryo-Stage ermöglicht Lichtmikroskopie unter stabilen kryogenen Bedingungen, indem ein konstanter Überdruck von gasförmigem Stickstoff gegenüber der Umgebungsatmosphäre aufrechterhalten wird. Alle Bewegungen, die für eine hochauflösende 3D-Bildgebung erforderlich sind, werden von der Stage unterstützt.

Um die Sicherheit des Ladevorgangs zu erhöhen, ist eine optionale Abdeckhaube erhältlich, in der das Transfer-Shuttle untergebracht ist. Diese Abdeckhaube sorgt für eine sichere Beladung unter allen Bedingungen, bietet zusätzliche Prozesskontrolle und verlängert das Zeitfenster für sichere Beladung.

STELLARIS Cryo Konfokalmikroskop
STELLARIS Cryo Konfokalmikroskop
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