Resuelva e identifique objetivos intracelulares en 3D

Para los flujos de trabajo correlativos, es vital recuperar las coordenadas exactas del objetivo identificadas en el criomicroscopio, ya que las señales de fluorescencia no son visibles en los pasos posteriores del microscopio electrónico.

Nuestro software LAS X Coral Cryo permite posicionar con precisión los marcadores de coordenadas de formato abierto en una escala nanométrica. También hay disponibles diferentes tipos de marcadores con diferentes funciones para las marcas de referencia, lamelas y marcadores. STELLARIS Cryo con el software LAS X Coral Cryo ofrece datos confocales 3D en formatos de archivo abiertos que se pueden importar a cualquier software de EM: TIFF, LIFE, ome.tiff.

LAS X Coral Cryo: Interpolación basada en la focalización en 3D usando secciones a través de la información en Z en dirección X e Y. Los marcadores se pueden mover de forma interactiva en todas las ventanas relevantes.
LAS X Coral Cryo: Interpolación basada en la focalización en 3D usando secciones a través de la información en Z en dirección X e Y. Los marcadores se pueden mover de forma interactiva en todas las ventanas relevantes.

Reducir los pasos de preparación entre STELLARIS cryo confocal y cryo-FIB.

El flujo de trabajo de tomografía crioelectrónica de Coral Cryo garantiza la viabilidad de las muestras, los controles de calidad y, sobre todo, imágenes 3D precisas y fiables.

STELLARIS Cryo, que incluye una platina criogénica y una lanzadera, se ha diseñado para utilizarse con el software LAS X Coral Cryo, así como con diversas opciones de integración y transferencia perfectas a las platinas Cryo FIB o VCT500. La nueva platina criogénica aumenta el rango de trabajo en aplicaciones no criogénicas, y permite usar STELLARIS también para obtener imágenes confocales.

Puede mantener la muestra segura durante la transferencia porque todos los componentes son compatibles.

Solución de flujo de trabajo de tomografía crioelectrónica Coral Cryo 3D
Solución de flujo de trabajo de tomografía crioelectrónica Coral Cryo 3D

STELLARIS de última generación

Observe detalles más finos en cada muestra, capture las señales más débiles y recopile los datos más precisos y fiables en todo el espectro.

Incorporar una dimensión adicional a sus experimentos con información basada en la vida útil de la fluorescencia hace posible lograr descubrimientos revolucionarios.

La productividad mejorada va de la mano de una configuración y navegación simplificadas.

Más información sobre la plataforma confocal STELLARIS.

Imagen del tiempo medio de llegada (TauContrast) de las muestras de raíz de Arabidopsis thaliana clareadas. Cortesía: W. Busch, Salk Institute, La Jolla, CA (EE. UU.).
Imagen del tiempo medio de llegada (TauContrast) de las muestras de raíz de Arabidopsis thaliana clareadas. Cortesía: W. Busch, Salk Institute, La Jolla, CA (EE. UU.).

Diferenciación de objetivos en el background con imágenes avanzadas

La sinergia perfecta entre nuestra familia de detectores Power HyD, una trayectoria de haz totalmente optimizada y los láseres de luz blanca de última generación ofrece un rendimiento excepcional en la obtención de imágenes. Sus resultados son más claros, con más detalles derivados de señales más brillantes, con más contraste y mayor sensibilidad, incluso cuando se obtienen imágenes con pocos marcadores y eventos.

Maximice la información que extrae de su muestra vitrificada y obtenga respuestas detalladas a cuestiones científicas gracias al exclusivo concepto de detección LIGHTNING, un proceso de extracción adaptativo que revela estructuras finas y detalles en la información de la imagen.

Esto le permite enfocarse con mayor precisión a las estructuras 3D de interés: a temperatura ambiente y en condiciones criogénicas, preparando los siguientes pasos de su flujo de trabajo de microscopía EM.

Las células de mamíferos se congelan en la rejilla de EM. Orgánulos teñidos con: TagBFP (núcleo, azul), cerúleo (membranas, verde), hmAzami-Green (mitocondria, naranja), mCitrine (Golgi, rojo), mCherry (ER, magenta), reflexión (visualización de cuadrícula y capa de carbono, blanco). Muestra por cortesía del Dr. Oleg Sitsel, Instituto Max Planck de Fisiología Molecular, Dortmund, Alemania. Barra de escala xy: 10 µm; z: 1 µm.
Las células de mamíferos se congelan en la rejilla de EM. Orgánulos teñidos con: TagBFP (núcleo, azul), cerúleo (membranas, verde), hmAzami-Green (mitocondria, naranja), mCitrine (Golgi, rojo), mCherry (ER, magenta), reflexión (visualización de cuadrícula y capa de carbono, blanco). Muestra por cortesía del Dr. Oleg Sitsel, Instituto Max Planck de Fisiología Molecular, Dortmund, Alemania. Barra de escala xy: 10 µm; z: 1 µm.

Rendimiento en el que puede confiar

En la criomicroscopía electrónica se debe supervisar el grosor del hielo a lo largo de todo el flujo de trabajo, y cuanto antes se compruebe y evalúe, mejor. Si el hielo es demasiado grueso, puede causar problemas durante la fase de fresado, y si es demasiado fino, puede afectar a la estabilidad de la muestra.

STELLARIS Cryo ofrece dos modos para comprobar el grosor del hielo: una visión general rápida con la cámara y un modo de reflexión confocal, que determina el grosor del hielo en 3D.

El objetivo Cryo CLEM HC PL APO 50x/0,90 se ha desarrollado para satisfacer las necesidades específicas de la criomicroscopía, proporcionando las ventajas de la superresolución sin necesidad de inmersión en líquido.

Células de mamífero que muestran Hoechst (azul, núcleo), Mitotracker Green (verde, mitocondria), Bodipy (rojo, gotas lipídicas), cuentas (magenta, 1 μm), Reflection (blanco). Barra de escala de 10 µm: Células proporcionadas amablemente por Ievgeniia Zagoriy, Mahamid Group, EMBL Heidelberg, Alemania
Células de mamífero que muestran Hoechst (azul, núcleo), Mitotracker Green (verde, mitocondria), Bodipy (rojo, gotas lipídicas), cuentas (magenta, 1 μm), Reflection (blanco). Barra de escala de 10 µm: Células proporcionadas amablemente por Ievgeniia Zagoriy, Mahamid Group, EMBL Heidelberg, Alemania

Elimine las señales no deseadas con información basada en la vida útil

STELLARIS ha reinventado la microscopía confocal al proporcionarle una dimensión adicional de información en cada experimento. Con TauSense, ponemos a su alcance nuevas herramientas revolucionarias basadas en la vida útil. Con solo unos pocos clics, puede eliminar señales no deseadas para revelar más detalles en sus imágenes, multiplexar más etiquetas en un único experimento, separar fluoróforos con más espectros superpuestos y aplicar el poder de la información basada en la vida útil para explorar cambios funcionales y microambientales localizados. Con TauSense, STELLARIS abre un mundo de posibilidades nuevas para su investigación.

TauSense en STELLARIS Cryo le permite explotar la posible diferencia en la vida útil de la fluorescencia para separar fluoróforos superpuestos. TauSense también se puede utilizar para identificar contribuciones de señal no deseadas, como la reflexión de la propia rejilla.

Diatomeas examinadas con herramientas de imagen TauSense. TauSeparation: Imagen izquierda: Componente de vida útil 1 que perfila la autofluorescencia de los cloroplastos, tiempo medio de llegada de los fotones 1 ns. Imagen central: Componente de vida útil 2 que revela la señal LifeAct-GFP limpia de los filamentos de actina, tiempo medio de llegada de 2,7 ns. Imagen derecha que muestra TauContrast: La tabla de búsqueda indica los tiempos de llegada por color: tiempos de llegada cortos en azul, tiempos de llegada más largos en amarillo tirando a rojo. Muestras por cortesía de Nicole Poulsen, B CUBE, TU Dresden, Alemania.
Diatomeas examinadas con herramientas de imagen TauSense. TauSeparation: Imagen izquierda: Componente de vida útil 1 que perfila la autofluorescencia de los cloroplastos, tiempo medio de llegada de los fotones 1 ns. Imagen central: Componente de vida útil 2 que revela la señal LifeAct-GFP limpia de los filamentos de actina, tiempo medio de llegada de 2,7 ns. Imagen derecha que muestra TauContrast: La tabla de búsqueda indica los tiempos de llegada por color: tiempos de llegada cortos en azul, tiempos de llegada más largos en amarillo tirando a rojo. Muestras por cortesía de Nicole Poulsen, B CUBE, TU Dresden, Alemania.

Minimice la contaminación durante la toma de imágenes

Las muestras deben mantenerse en condiciones deshumidificadas y criogénicas inmediatamente después de la vitrificación durante los flujos de trabajo criogénicos. El kit de criomicroscopía, que incluye una platina criogénica y una lanzadera, garantiza una carga segura e intuitiva, así como una transferencia sencilla, de las muestras, con estas en todo momento en condiciones criogénicas óptimas.

La platina criogénica le permite realizar microscopía óptica en condiciones criogénicas estables, manteniendo una sobrepresión constante de nitrógeno gaseoso contra la atmósfera circundante. La platina admite todos los movimientos necesarios para obtener imágenes 3D de alta resolución.

Para mejorar la seguridad del proceso de carga, hay disponible una caja protectora opcional que alberga la lanzadera de transferencia. Esta caja protectora garantiza una carga segura en todas las condiciones, proporciona un control adicional del proceso y amplía la ventana de tiempo de carga segura.

Microscopio confocal STELLARIS Cryo
Microscopio confocal STELLARIS Cryo
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