DIC

DIC son las siglas inglesas de contraste interdiferencial, una técnica de contraste óptico para microscopía que permite observar estructuras sin tinción en las células de especímenes biológicos con un contraste y una resolución adecuados. También puede ayudar a visualizar pequeñas diferencias de altura en las superficies de los materiales. Solo se utiliza luz polarizada para iluminar la muestra. La luz polarizada se dispersa en dos rayos de luz distintos con un plano ortogonal de polarización. A medida que los rayos experimentan una refracción o dispersión diferentes en la muestra, se producen diferentes desplazamientos de fase. Cuando estos rayos de luz se vuelven a unir, interfieren y se polarizan elípticamente. Esta polarización puede transformarse en un cambio de amplitud mediante un analizador. Los cambios de fase correspondientes a diferencias tan pequeñas como 1/1000 de la longitud de onda (cuando se detectan con un sensor de cámara) se pueden observar en las imágenes DIC. Las imágenes de microscopía DIC parecen tener relieve y sombra.

Un microscopio DIC es un microscopio convencional de campo ancho que utiliza filtros de polarización y prismas Wollaston.

La luz de una fuente pasa a través de un filtro y se polariza 45°. Después de pasar a través de un prisma Wollaston, la luz se separa en componentes polarizados perpendiculares donde uno está polarizado a 0° y el otro a 90°. La lente del condensador enfoca la luz sobre la muestra que está iluminada por dos rayos paralelos coherentes con diferente polarización. Los rayos experimentan diferentes longitudes de recorrido óptico, ya que puede haber diferencias en el grosor o el índice de refracción a lo largo del recorrido por el que pasan a través de la muestra.

Esto provoca el desplazamiento de fase de un rayo en comparación con el otro. Después de atravesar el objetivo y otro prisma Wollaston, la luz polarizada perpendicularmente se recombina para convertirse en una luz polarizada a 135°. En función de las diferencias en las longitudes del recorrido óptico, la interferencia de los dos rayos provoca una interferencia constructiva (brillo) o destructiva (oscurecimiento), lo que hace que las estructuras apenas visibles con campo claro puedan verse ahora con DIC.

Finalmente, la luz transmitida directamente, que no experimentó ningún desplazamiento de fase, es eliminada por el filtro de polarización (también llamado analizador), que solo deja pasar la luz polarizada a 135°.