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Capturez plus de données* à partir de votre échantillon

Les cellules vivantes réagissent en activant des voies de stress lorsqu’elles sont exposées à la source lumineuse intense, généralement utilisée pour l’imagerie en fluorescence.

La sensibilité accrue de la caméra K8 permet d’utiliser une illumination réduite* pour la capture des images, ce qui améliore la viabilité des cellules et vous permet d’extraire plus longtemps des données significatives de votre échantillon.

Leader du marché, le capteur de la caméra K8 offre, avec son efficacité quantique de 95 %, une détection exceptionnelle des photons, pour repousser les limites de vos expériences.

*Par rapport à des caméras CMOS classiques offrant une QE de 80 %.

Démonstration de la phototoxicité par imagerie de cellules vivantes, les cellules à gauche mourant après une heure. Les cellules à droite restent saines durant l'imagerie en time-lapse. Cellules COS-7 marquées avec du MitoView Green et de l’ester éthylique de tétraméthylrhodamine (TMRE) (canal rouge). Le marquage TMRE indique le potentiel de la membrane mitochondriale, le marquage disparaît en réponse à un stimulus de stress tel que la phototoxicité, indiquant l’amorce d’apoptose dans les cellules.

Images THUNDER d’une netteté extraordinaire, même dans des conditions de très faible luminosité

Contrairement aux échantillons fixés, pour lesquels les utilisateurs doivent généralement acquérir une seule image d’un échantillon marqué avec des fluorochromes photostables, les expériences d’imagerie sur cellules vivantes nécessitent des centaines, voire des milliers d’images d’un échantillon photosensible pour obtenir un time-lapse. Afin d’obtenir des résultats pertinents, il est souvent nécessaire d’utiliser des expositions beaucoup plus courtes et des intensités d’excitation plus faibles pour éviter toute dégradation de l’échantillon liée à une exposition à la lumière, ce qui se traduit par des images à faible rapport signal/bruit (SNR).

Moins il y a de lumière sur vos échantillons, plus le rapport signal/bruit est faible. C’est à ce moment-là que la caméra K8 montre vraiment sa puissance, en fournissant des images d’une netteté extraordinaire même dans des conditions de très faible luminosité. La caméra K8 vous assiste dans vos travaux de recherche grâce à des images THUNDER améliorées par calcul, avec des artefacts minimaux, y compris à des niveaux de signal extrêmement faibles.

Caméra CMOS K8

Images THUNDER à faible rapport signal/bruit de microtubules marqués avec de l’Alexa 488, capturées avec une caméra sCMOS offrant une QE de 80 % (à gauche) et avec la K8 (à droite). Les images ont été acquises en utilisant des expositions et des paramètres d’excitation identiques. L’image capturée avec la K8 montre beaucoup plus de détails, car des informations sont perdues dans le bruit de fond de la caméra moins sensible avec son efficacité quantique de seulement 80 %.

Repoussez les limites de vos expériences

Profitez d’une netteté et d’une précision accrues par AI grâce à la puissante combinaison de THUNDER et d’Aivia pour analyser les images de fluorescence avec une plus grande précision, même en utilisant une faible excitation lumineuse.

Leica propose une trilogie unique de technologies (caméra CMOS scientifique K8 pour microscope, THUNDER et Avia), qui vous permet de repousser les limites de vos recherches tout en extrayant des données quantifiables de haute qualité à partir des images.

Les vidéos (A et B, ci-dessus) montrent les mitochondries de cellules COS-7 marquées avec du TMRE. Les deux séquences ont été acquises en utilisant des expositions de 15 ms et des intensités d'illumination identiques. Les cellules ont d’abord été imagées avec une caméra offrant une QE de 80 % afin d’éliminer l’impact du photo-blanchiment (à gauche). Pour la même exposition à la lumière, la K8 (à droite) produit des rapports signal/bruit significativement plus élevés. Les vidéos (C et D, ci-dessous) montrent que le logiciel d’analyse Aivia est capable d’identifier et de suivre 75 % d’objets supplémentaires dans les séries de données capturées à l’aide de la caméra K8.

Cellules COS7

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Image améliorée par THUNDER de cellules COS marquées avec DAPI (bleu), des microtubules (vert), des mitochondries (rouge) et des cadhérines E (gris).
Image améliorée par THUNDER de cellules COS marquées avec DAPI (bleu), des microtubules (vert), des mitochondries (rouge) et des cadhérines E (gris).

Cerveau de rat

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La figure montre une image THUNDER acquise avec la caméra CMOS scientifique K8 d’un cerveau de rat marqué avec du DAPI (bleu), de la fluorescéine STL (vert), du GFAP-Cy3 (rouge) et du NeuN Cy5 (gris). Échantillon fourni par FAN GmbH.
La figure montre une image THUNDER acquise avec la caméra CMOS scientifique K8 d’un cerveau de rat marqué avec du DAPI (bleu), de la fluorescéine STL (vert), du GFAP-Cy3 (rouge) et du NeuN Cy5 (gris). Échantillon fourni par FAN GmbH.

Cellules MDCK

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La figure montre une image THUNDER acquise avec la caméra CMOS scientifique K8 de cellules MDCK colorées avec Hoechst (bleu), Giantin Alexa 488 (vert), LaminB Alexa 555 (rouge) et Catenin Alexa 647 (gris). Échantillon fourni par Ralf Jacob, université de Marburg.
La figure montre une image THUNDER acquise avec la caméra CMOS scientifique K8 de cellules MDCK colorées avec Hoechst (bleu), Giantin Alexa 488 (vert), LaminB Alexa 555 (rouge) et Catenin Alexa 647 (gris). Échantillon fourni par Ralf Jacob, université de Marburg.
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