STELLARIS STED
Des données fiables, plus vite !
Notre technologie STED (STimulated Emission Depletion) s'ajoute à notre plateforme confocale STELLARIS pour vous offrir la méthode la plus rapide pour imager au-delà de la limite de diffraction. En une fraction de seconde, obtenez des résultats de nanoscopie de pointe avec une qualité et une résolution d’image étonnantes, tout en préservant votre échantillon. La microscopie de super-résolution STED vous permet d'étudier simultanément plusieurs événements dynamiques, et donc de comprendre les relations et les mécanismes moléculaires dans le contexte cellulaire.
L’intégration transparente de STED et de notre plateforme STELLARIS offre un accès facile au STED directement depuis l’interface confocale. En quelques clics, vous pouvez obtenir plus d’informations sur votre échantillon, car chaque détail compte.
TauSTED Xtend : Net. Simple. Superbe.
TauSTED Xtend est l'étape suivante de l’évolution de l’imagerie TauSTED. Il combine des informations basées sur le temps de vie avec une lecture spatiale supplémentaire. Cela se traduit par un gain de résolution significatif, en particulier à des puissances de déplétion STED plus faibles, ce qui permet d’étendre des capacités d’imagerie multicolore sur échantillons vivants à une échelle nanométrique remarquable. Téléchargez la note d’application pour en savoir plus sur TauSTED Xtend.
PUISSANCE
Résolvez les plus petits détails dans leur contexte à l’échelle nanométrique. Réalisez une imagerie sur échantillons vivants plus longue et à une résolution de pointe.
POTENTIEL
Utilisez des fluorophores standard et suivez vos protocoles préférés pour le STED. Réalisez une imagerie multicolore étendue, même avec une seule ligne laser STED.
PRODUCTIVITÉ
Observez directement des processus rapides avec une résolution à l’échelle nanométrique. Obtenez un retour d’information instantané pendant la réalisation de vos expériences.
Échantillon fixé multicolore. TauSTED Xtend 775 ; Vimentine AF594 (cyan), Phalloïdine ATTO 647N (magenta) et NUP107 CF680R (luminescent). Largeur de l’image : 39 nm. Échantillon fourni avec l’aimable autorisation de Brigitte Bergner, Mariano Gonzales Pisfil, Steffen Dietzel, Core Facility Bioimaging, Biomedical Center, Ludwig-Maximilians-University, Munich, Allemagne
Imagerie douce multicolore en direct à une nanoéchelle remarquable
L'imagerie dynamique des échantillons vivants reste l’approche expérimentale la plus difficile. Pour obtenir des résultats scientifiquement pertinents, la dose de lumière laser doit, en fonction de votre échantillon et du fluorophore, être suffisamment faible pour éviter le photoblanchiment et la phototoxicité.
Avec STELLARIS qui inclut les Lasers Blancs (WLL) de dernière génération, les détecteurs Power HyD et l’accès aux technologies de temps de vie (TauSense, FALCON), l’imagerie multicolore en live et les expériences d’imagerie fonctionnelle sont devenues de routine en imagerie confocale.
Avec TauSTED Xtend, vous pouvez réduire considérablement l’excitation et la dose de lumière STED à un niveau qui vous permet d’étudier les processus biologiques sur de longues périodes de temps, même à l’échelle nanométrique.
Résolvez les plus petits détails dans leur contexte à l’échelle nanométrique
Vous recherchez des stratégies de super-résolution qui vous permettent de suivre vos cibles biologiques d’intérêt dans le temps et l’espace avec un minimum de perturbations externes ?
TauSTED réduit déjà considérablement les doses d’excitation et de lumière STED, en améliorant considérablement la résolution par rapport à l’imagerie confocale standard ainsi qu’aux approches en gatedSTED classiques.
TauSTED Xtend va plus loin en améliorant la résolution maximale atteignable et révèle un signal sans ambiguïté, même à une puissance de déplétion STED inférieure.
![[Translate to french:] TauSTED Xtend reveals the distribution of nuclear pores (NPCs) on COS7 cells immunostained for NUP complexes with AF 488. Only 0.5% of STED light reveals much more detail.](/fileadmin/_processed_/3/0/csm_From_Confocal-to-TauXTED-Xtend_crop_625577d63e.jpg "[Translate to french:] From Confocal to TauSTED Xtend")
Repoussez les limites de la résolution
TauSTED mesure les données sur le temps de vie de fluorescence acquises lors de chaque image STED et cartographie la réponse STED du fluorophore en temps réel. L’accès à ces informations vous permet d’améliorer la qualité de l’image (signal/bruit), d’éliminer les photons du bruit de fond à l’aide de principes physiques, et de repousser la résolution STED au-delà des limites seulement basées sur l’intensité, quelles que soient l’excitation et la ligne laser STED (589, 660, 775) que vous utilisez.
TauSTED Xtend est la prochaine étape dans l’évolution de l’imagerie STED et combine les informations basées sur le temps de vie avec une lecture spatiale supplémentaire. Vous constaterez un gain de résolution significatif, en particulier à des puissances de déplétion STED plus faibles, ce qui vous permettra d’étendre les capacités d’imagerie en live à une nanoéchelle remarquable.
Utilisez vos protocoles standard
Souhaitez-vous réduire votre résolution à une échelle nanométrique, en utilisant des protocoles habituels et une large gamme de fluorochromes couramment utilisés dans la recherche en sciences de la vie ?
TauSTED Xtend offre de nouvelles opportunités pour les expériences monocolores et multicolores avec les protéines fluorescentes vertes et les fluorophores qui sont un outil de travail dans la recherche en sciences de la vie et sont actuellement sous-utilisés dans les études nanoscopiques.
Vous pouvez élargir la palette de fluorophores, même avec une seule ligne laser STED, en tirant parti des capacités spectrales uniques de STELLARIS.
Imagerie 2c TauSTED Xtend de cellules de mammifères marquées avec CF440 – Phalloïdine (glow) et immunomarquées contre la tubuline avec StarGreen (cyan). Barre d'échelle : 2 µm
Augmentez le nombre d’événements simultanés que vous pouvez étudier à l’échelle nanométrique
Le marquage en fluorescence multicouleur a la capacité de révéler les liens entre les organelles intracellulaires. Vous pouvez ainsi imager différents compartiments avec une spécificité moléculaire.
STED et STELLARIS excellent dans les applications multicouleurs. Vous pouvez utiliser les meilleurs fluorochromes dans la région rouge du spectre, opter pour des protéines fluorescentes dans le vert ou exploiter de nouvelles sondes fluorogènes dans l’orange. Vous pouvez réaliser des études de colocalisation et les résoudre avec des détails en dessous de la limite de diffraction.
Notre détection spectrale vous offre jusqu’à 5 détecteurs Power HyD compatibles STED, ce qui vous permet d’étendre le nombre d’acteurs moléculaires à localiser dans le temps et l’espace. En outre, les capacités numériques et la vitesse des détecteurs Power HyD, avec un temps mort de 1,5 ns pour l'ensemble du système, garantissent une excellente qualité d'image en termes de rapport signal/bruit et de background, tout en offrant un temps de collecte des photons par pixel au moins 10 fois supérieur à celui des photodiodes à avalanche (APD).
*Hybridation monomoléculaire in situ
Étendez les capacités STED multicolores avec la séparation des temps de vie de fluorescence
En combinant les modalités STED et FALCON sur STELLARIS, vous pouvez élargir la palette de fluorophores pour étudier encore plus l’interaction moléculaire à une résolution nanoscopique, car vous pouvez séparer les fluorochromes en utilisant leur temps de vie de fluorescence.
Les spectres d'émission de ces fluorophores ne peuvent pas être distingués à l'aide d'une acquisition traditionnelle en intensité. Le STED-FLIM combiné à notre module phasor permet de séparer clairement les fluorophores par leur temps de vie distinct, y compris en utilisant un seul détecteur.
Obtenez vos résultats à la volée dans le temps et l’espace
Voyez ce qui se passe au fur et à mesure de votre expérience, dans le temps et l’espace avec une résolution à l’échelle nanométrique. Avec TauSTED Xtend, vous pouvez évaluer des processus rapides à la volée et recevoir un retour d’information instantané sur les résultats pendant la réalisation de vos expériences.
Des performances STED optimales grâce à l’autoalignement du laser en un clic, protégeant ainsi votre échantillon de l’irradiation lumineuse et permettant un positionnement optimal des lasers de manière entièrement automatisée.
Une imagerie de vastes zones en un rien de temps avec LAS X Navigator. Sélectionnez vos zones d’intérêt pour l’imagerie STED.
Validez vos résultats grâce aux fonctionnalités STELLARIS, comme l’accès aux données brutes et le comptage de photons rapide et efficace.
Imagerie STED 2D et 3D avec intensité de signal et résolution exceptionnelles
Avec STED et STELLARIS, vous obtenez les résultats souhaités en 2D et 3D car la résolution devient réglable en x, y et z. Pour vous garantir une intensité lumineuse et une résolution maximales en 2D et 3D, nous vous fournissons les meilleures solutions optiques pour une superposition optimale de l’excitation et de la PSF STED sur l’ensemble du spectre et pour que les capacités de quantification ne soient pas perdues en raison de corrections adaptatives.
Notre gamme d'objectifs STED WHITE a été spécialement développée pour garantir des conditions optimales pour une variété d’expériences STED :
- L'objectif à immersion huile STED WHITE 100x fournit la plus haute résolution et offre d’excellentes performances pour l’imagerie quotidienne d’échantillons fixés.
- L'objectif à immersion glycérol STED WHITE 93x fournit une correction adaptative des fluctuations de température, des changement d'indice de réfraction et des inhomogénéités lors d'une observation en profondeur dans l’échantillon, grâce à la technologie de bague de correction entièrement motorisée motCORR.
- L'objectif à immersion eau STED WHITE 86x avec motCORR fournit également une correction adaptative, tel qu'expliqué ci-dessus, et est idéal pour les applications sur cellules vivantes délicates et la STED-FCS(1).
(1) “High photon count rates improve the quality of super-resolution fluorescence fluctuation spectroscopy” F. Schneider et al. J. Phys. D : Appl. Phys. 53 164003, 2020.
