Leica LMD6 & LMD7 Microdissection laser
La microdissection laser (LMD, également appelée microdissection par capture laser [LCM]) permet d'isoler des cellules isolées spécifiques ou des zones tissulaires entières. Les systèmes Leica LMD qui reposent sur une conception laser unique en son genre et un logiciel dynamique, permettent aux utilisateurs d'isoler facilement des régions d'intérêt (ROI) telles que des zones tissulaires entières, des cellules isolées et même des structures subcellulaires comme les chromosomes.
Un seul principe, deux systèmes
La microdissection laser est généralement utilisée en génomique (ADN), transcriptomique (mARN, miARN), protéomique, métabolomique, et aussi en séquençage de dernière génération (NGS). Les chercheurs en neurologie, cancérologie, analyse du végétal, criminalistique ou climatologie se fient à cette méthode. De plus, la microdissection laser est l'outil parfait pour la culture de cellules vivantes (LCC), le clonage et la remise en culture, la manipulation ou l'analyse en aval.
C'est le laser qui se déplace, pas l'échantillon. De plus, nous avons recours à la gravité pour la collecte des échantillons. C'est pourquoi nos systèmes LMD vous fournissent des échantillons disséqués parfaitement coupés, exempts de contamination et prêts pour l'analyse.
Choisissez la puissance voulue
c'est le laser qui différencie le Leica LMD6 du Leica LMD7. Ainsi, le Leica LMD6 est l'outil parfait pour les applications standard de dissection de tissus mous tels que cerveau, foie ou rein. Le Leica LMD7 convient idéalement à la dissection de tout type de tissu, quels que soient ses dimensions et sa forme. Il fournit davantage de flexibilité, un laser de plus grande puissance et un plus grand nombre de paramètres de commande du laser.
C'est le laser qui se déplace, pas l'échantillon
Essayez d'écrire votre nom sur un morceau de papier en déplaçant le papier au lieu du stylo. Vous trouvez ça difficile ? C'est pourquoi nous avons fait en sorte qu'en microdissection laser le laser se déplace et l'échantillon reste immobile. Chez Leica Microsystems, nous sommes les seuls à nous servir d'une optique de haute précision pour diriger le faisceau laser sur le tissu avec des prismes, le long du trait de coupe souhaité. Cela signifie que le système LMD de Leica coupe perpendiculairement au tissu et réalise des coupes nettes d'éléments isolés, exempts de contamination.
La précision. A toutes les étapes.
- Vous réalisez des coupes d'une précision optimale, à la vitesse maximale.
- Vous pouvez couper directement et en temps réel avec la fonction « Move and Cut ».
- Vous bénéficiez d'une image optimale pour réaliser facilement des films.
C'est le laser qui se déplace, pas l'échantillon
Les paramètres de puissance, d’ouverture, de vitesse, de courant de tête et de fréquence d’impulsion du LMD7 sont réglables selon votre échantillon. Par exemple, des coupes de plantes épaisses nécessitent une puissance élevée, tandis que la découpe autour de neurones fragiles nécessitera moins d’énergie. Les découpes de sections minces se font généralement plus rapidement que les découpes de sections épaisses.
Les modes de coupe avancés permettent de disséquer l'échantillon avec une plus grande précision. Par exemple, vous pouvez dessiner d’abord et couper ensuite (Draw + Cut), ou couper en temps réel par un clic de souris ou avec un STYLO tactile (Move + Cut). Le mode Draw + Scan est conçu pour réaliser la découpe du verre, tandis que le mode Laser Screw permet de découper des échantillons épais en plusieurs fois. Le mode Final Pulse vous permet de lancer des dissections complexes dans le récipient de collecte.
Le choix de la gravité pour la pureté
Votre analyse en aval repose sur l'absence de contamination des éléments isolés. Pour cette raison, les systèmes LMD de Leica collectent par gravité les échantillons disséqués. Ils utilisent une méthode unique de dissection basée sur guidage laser, qui préserve l'intégrité des éléments isolés – sans contact ni contamination.
1, 2, 3... échantillon exempt de contamination !
- Vous choisissez la zone d'intérêt.
- Vous déplacez le laser le long de la zone à découper.
- L'échantillon disséqué tombe dans le couvercle du tube ou la boîte de Pétri, prêt pour être analysé – exempt de contamination à 100 %.
L'atout véritable : la gravité ne fait jamais défaut.
Le logiciel simplifie la LMD
Ce sont les résultats qui vous intéressent, pas la façon de les obtenir... Alors, vous aimerez notre logiciel d'application dédié, orienté vers le flux de travail et intuitif. Facile à utiliser et puissant, il permet de sélectionner, disséquer et visualiser les échantillons disséqués.
- Ayez une vue d'ensemble de l'échantillon pour mieux l'orienter.
- Guidez le faisceau laser avec la souris ou l'écran tactile.
- Pilotez le laser et le microscope.
- Enregistrez une vidéo pour une observation en time-lapse.
- Des logiciels optionnels supplémentaires tels qu'une base de données images, la reconnaissance de cellules automatisée (techniques avancées d’analyse par ordinateur, reconnaissance de formes) et bien plus encore sont disponibles. Contactez votre représentant Leica local pour découvrir notre gamme de produits !
- Enfin : gagnez du temps, faites moins d'efforts
Options Automatiques
L’ADM (mode de détection automatique) est un module logiciel qui permet de collecter de grandes quantités de dissections similaires. Il vous suffit d’entourer une zone qui vous intéresse et le logiciel l’utilisera comme modèle pour d’autres régions. Par exemple, l’analyse de la protéomique nécessite la capture d’une grande quantité d’échantillons, et ADM a fourni un grand avantage aux laboratoires travaillant avec 100 à 1 000 dissections.
L’autofocus peut être utilisé avant chaque processus de dissection pour maintenir la mise au point de centaines de ROI réparties sur la lame. Par ailleurs, vous pouvez inspecter et documenter automatiquement tous les dispositifs de collecte qui ont été utilisés.
L’approche systématique : Un outil matriciel sépare votre champ de vision en un nombre donné de régions. Grâce à cette fonction, vous pouvez disséquer systématiquement votre échantillon et recueillir votre dissection dans divers dispositifs de prélèvement, dont les plaques 96 puits.
Interface pour l’intelligence artificielle
Aivia est notre plateforme de visualisation, d’analyse et d’interprétation d’images basée sur l’IA. À l’aide d’outils améliorés par l’IA tels que le Pixel Classifier, Aivia peut être utilisé pour définir automatiquement les régions d’intérêt (ROI) qui sont destinées à la microdissection laser (LMD). Les ROI peuvent être détectés par Aivia et importés directement dans le logiciel LMD pour la microdissection.
Outre Aivia, d’autres logiciels externes peuvent être utilisés pour la détection automatique du retour sur investissement. Le logiciel LMD a simplement besoin d’un fichier XML contenant les informations de ROI.
- Mund et al., Nature Biotechnology, 2022 https://doi.org/10.1038/s41587-022-01302-5
- Mitchell et al., JoVE, 2022 https://doi.org/10.3791/64171
HCapacité de débit élevé
Besoin de plus de volume ? Les systèmes LMD peuvent être configurés avec différents types de platines. La platine de balayage ultra LMT350 offre le guidage le plus rapide, le plus silencieux et le plus précis parmi eux
Le LMT350 est capable de contenir des récipients collecteurs allant de bouchons de tube de 0,2 ml à des plaques de 96 puits et 384 puits* standard, en passant par 8 et 12 bandes de bouchons. Cela vous permet de réaliser des expériences à haut débit.
Comme vous n’avez pas besoin de matériaux spéciaux, mais utilisez des plaques de microtitration classiques, ces plaques peuvent être chargées directement dans des machines PCR standard.
*352 puits adressables max.
Économisez sur les consommables
Du fait que les systèmes LMD de Leica collectent par la seule gravité les échantillons disséqués, vous pouvez utiliser pour leur collecte des dispositifs standard de votre laboratoire ou des consommables courants en biologie moléculaire tels que les bouchons de microtubes de 0,2 ou 0,5 ml. Pour la microdissection laser, les dispositifs de collecte peuvent être à secs ou remplis d'un tampon de réaction ou d'un milieu de culture.
- Utilisez des porte-objets recouverts d'une membrane pour des résultats optimaux en mode « move and Cut » : coupez directement l'échantillon vivant. Cette méthode est la façon la plus efficace et rapide d'obtenir un échantillon disséqué de qualité optimale.
- Utilisez le mode « Draw and Scan » pour couper à partir de lame en verre normal, de lamelles ou de lames DIRECTOR : cette méthode est appelée ablation par laser ou dissection par balayage point à point, et elle permet d'effectuer des collectes sans membrane.
L'objectif fait le succès
Les meilleures coupes sont réalisées avec des objectifs dédiés et optimisés pour la tâche à accomplir. Étant donné que le développement et la fabrication de l'optique font partie de nos compétences fondamentales depuis le début du 19e siècle, vous pouvez compter sur les performances de nos objectifs dédiés à la LMD : notre série SmartCut.
- Choisissez dans une gamme parmi 10 objectifs à secs – de 5x à 150x.
- Utilisez l'unique objectif 150x SmartCut pour voir en détail avec un fort grossissement et une haute résolution, chaque fois que c'est nécessaire.
- Obtenez avec les objectifs à faible grossissement un grand champ visuel pour couper en une fois de grandes parties des échantillons.
- Utilisez des objectifs compatibles avec une excellente transmission de la source laser (350 nm), pour couper les tissus, les os, les dents, le cerveau, les plantes, les chromosomes et les cellules vivantes. Essayez-les pour votre application !
Il va sans dire que nos objectifs délivrent des performances exceptionnelles en imagerie.
Découpe facile de cellules vivantes
Si vous travaillez sur des cellules vivantes, vous avez l'habitude des microscopes inversés. Nos systèmes LMD coupent en douceur les cellules vivantes, même si les systèmes LMD de Leica sont basés sur un microscope droit.
- Vous pouvez disséquer des cellules vivantes en culture afin de remettre en culture, cloner ou analyser des cellules isolées, des colonies ou des agrégats de cellules.
- Vous pouvez même équiper le LMD d’une chambre d’incubation.
- Vous pouvez faire croître des cellules dans des boîtes de Pétri avec une membrane PEN ou des porte-objets multi-puits Ibidi.
- Aux fins d'analyse, vous pouvez collecter l'échantillon disséqué, issu d'une culture de cellules vivantes, dans une boîte de Pétri avec ou sans membrane PEN, porte-objet Ibidi ou microtube en barrette de 8 pour la remise en culture, ou dans un dispositif de collecte tel qu'un bouchon de microtube PCR.
Vous trouverez des informations complémentaires concernant la coupe de cellules vivantes dans notre article de Science Lab sur les consommables.
Système combiné : Système LMD avec imagerie THUNDER
Les systèmes LMD6 et LMD7 peuvent être combinés avec THUNDER. Le support de base des systèmes THUNDER Imager 3D Tissue et LMD est le même, ce qui permet de combiner les deux systèmes :
- Gain de place en laboratoire avec un seul système pour différentes tâches
- Microdissection laser avec le LMD sans limite Imagerie fluorescente
- Brilliant THUNDER utilisant LAS X, même en multicolore et 3D (z-stacks) et visualisation dans la visionneuse 3D.
