DIC

DIC signifie contraste interférentiel différentiel, une technique de contraste optique pour la microscopie qui permet d’observer des structures non colorées dans les cellules d’échantillons biologiques avec un contraste et une résolution adéquats. Il permet également d'observer des différences infimes de hauteur sur les surfaces des matériaux. Seule de la lumière polarisée est utilisée pour éclairer l’échantillon. La lumière polarisée est dispersée en deux rayons lumineux distincts avec un plan de polarisation orthogonal. Étant donné que les rayons subissent une réfraction ou une diffusion différente dans l’échantillon, divers changements de phase se produisent. Lorsque ces rayons lumineux se réunissent, ils interfèrent et deviennet polarisés elliptiquement. Cette polarisation peut être modifiée en un changement d’amplitude via un analyseur. Des déphasages correspondant à des différences aussi faibles que 1/1000 d’une longueur d’onde (lorsqu’elle est détectée par un capteur de caméra) peuvent être observés dans les images DIC. Les clichés de microscopie DIC ressemblent à des reliefs ombrés.

Un microscope DIC est un microscope conventionnel à champ large qui utilise des filtres de polarisation et des prismes Wollaston.

La lumière d’une source passe à travers un filtre et devient polarisée à 45°. Après avoir traversé un prisme Wollaston, la lumière est séparée en composants polarisés perpendiculaires où l’un est polarisé à 0° et l’autre à 90°. La lentille du condenseur focalise la lumière sur l’échantillon qui est éclairé par 2 rayons parallèles cohérents avec une polarisation différente. Les rayons présentent différentes longueurs de trajet optique, car il peut y avoir des différences d’épaisseur ou d’indice de réfraction le long du chemin où ils traversent l’échantillon.

Il en résulte un déphasage d’un rayon par rapport à l’autre. Après avoir traversé l’objectif et un autre prisme Wollaston, la lumière polarisée perpendiculairement est recombinée pour devenir une lumière polarisée à 135°. En fonction des écarts de longueur de trajet optique, les interférences des 2 rayons provoquent des interférences constructives (lumineuses) ou destructives (sombres), ce qui rend les structures à peine visibles en fond clair désormais observables avec le DIC.

Enfin, la lumière transmise directement, qui n’a subi aucun déphasage, est éliminée par le filtre de polarisation (également appelé analyseur), qui ne laisse passer que la lumière polarisée à 135°.