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Cellule U2OS colorate con MitoTracker verde (struttura dei mitocondri, ciano) e TMRE (mitocondri attivi, magenta). Acquisizione sequenziale dei due canali per 2 minuti durante i quali sono stati acquisiti 100 frame utilizzando l'obiettivo 63x/1.20 CS2 Water MotCORR.
Crescita di sferoidi per 2,5 giorni
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Formazione di sferoidi 3D da 1000 cellule MDCK MX1-GFP stabilmente trasfettate per pozzetto (fila superiore) e 1000 cellule U2OS per pozzetto (fila inferiore). Acquisizione time-lapse di 60 ore con intervallo di 30 minuti. Verde, GFP. Bianco e nero, contrasto a modulazione integrato.
Formazione di sferoidi 3D da 1000 cellule MDCK MX1-GFP stabilmente trasfettate per pozzetto (metà sinistra) e 1000 cellule U2OS per pozzetto (metà destra) mostrate in 5 punti temporali diversi. Acquisizione in time-lapse di 60 ore con intervallo di 30 minuti. Verde, GFP. Grigio, contrasto a modulazione integrato.
Montare il campione
Montare il campione
Posizionare il campione
Posizionare il campione
Definire l'illuminazione 1
Avvia acquisizione live
Definire l'illuminazione 2
Definire le posizioni
Definire l'illuminazione 3
Acquisire
Definire l'illuminazione 4
Scegliere le immagini
Definire il gain del detector
Eseguire la segmentazione
Definire la dimensione del pinhole
Eseguire l'analisi
Definire la modalità di scansione
Definire il dwell time
Definire l'offset
Definire il line step
Definire la modalità di averaging
Definire il metodo di averaging
Definire il numero di average
Acquisire
Elaborare i dati
Scegliere le immagini
Definire le soglie
Definire i separatori
Eseguire la segmentazione
Eseguire l'analisi
Estrarre informazioni
Creare figure
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Sezione di tessuto di cervello di ratto. I nuclei sono colorati con DAPI (blu), STL con FITC (verde), gli astrociti (GFAP) con Cy3 (giallo) e i neuroni di nuova formazione (NeuN) con Cy5 (rosso). Mosaico in modalità widefield al 10x, tutte e 4 le marcature sono state acquisite simultaneamente.
Cellule U2OS colorate con MitoTracker verde (struttura dei mitocondri, ciano) e TMRE (mitocondri attivi, magenta). Acquisizione simultanea dei due canali per 2 minuti durante i quali sono stati acquisiti 100 frame utilizzando l'obiettivo 63x/1.20 CS2 Water MotCORR.
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Acquisizione sequenziale con un microscopio convenzionale
Acquisizione simultanea con Mica
Cellule U2OS colorate con MitoTracker verde (struttura dei mitocondri, ciano) e TMRE (mitocondri attivi, magenta). Acquisizione simultanea dei due canali per 2 minuti durante i quali sono stati acquisiti 100 frame utilizzando l'obiettivo 63x/1.20 CS2 Water MotCORR.
Colture cellulari in 3D, formazione di sferoidi di 7 gg da cellule U343. tfLC3 EGFP e mRFP + DAPI + WGA Alexa680. Obiettivo: 20x/0.75 CS2 DRY
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Sezione di tessuto intestinale acquisita con obiettivi diversi che vanno da un basso ad un alto ingrandimento (1,6x, 10x, 20x, 63x), utilizzando le modalità di imaging widefield e confocale. Le immagini acquisite in modalità widefield al 20x sono state processate con THUNDER e le immagini confocali acquisite al 63x sono state invece processate con LIGHTNING. I nuclei sono marcati in blu, i mitocondri in verde e la tubulina detirosinata in rosso.
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Le cellule U2OS sono state marcate con SiR-Actin, TMRE (attività mitocondriale), CellEvent™ (attività della caspasi) e DAPI (nuclei). La staurosporina induttore di apoptosi è stata aggiunta al time-point 0. Ingrandimento 63x, modalità widefield. Time-lapse di 13 ore.