Contrasto di fase

Un microscopio a contrasto di fase è simile a un microscopio standard a campo chiaro, tranne per il fatto che utilizza un'apertura a forma di anello e una piastra di fase a quarto d'onda (λ/4). L'apertura anulare è posta tra la fonte luminosa e la lente del condensatore e la lamina di fase dopo l'obiettivo all'interno dell'ottica del microscopio. La luce a forma di anello che passa attraverso l'apertura viene messa a fuoco dal condensatore sul campione biologico da osservare.

Porzioni della luce a forma di anello vengono diffratte da strutture otticamente dense del campione e sperimentano uno spostamento di fase negativo di circa λ/4. Questa luce diffratta, sottoposta a spostamento di fase bypassa la piastra λ/4. Al contrario, la porzione della luce a forma di anello che passa direttamente attraverso il campione non deviato colpirà la piastra di fase provocando uno spostamento di fase positivo λ/4. Dato che la differenza totale nello spostamento di fase tra la luce diffratta dalle strutture del campione e quella che passa attraverso la piastra di fase sarà di circa λ/2, si verificherà un'interferenza distruttiva. Di conseguenza, le strutture più dense otticamente appariranno più scure di quelle meno dense.