DIC

DIC é o contraste de interferência diferencial, uma técnica de contraste óptico para microscopia que permite que estruturas não coloridas nas células de espécimes biológicos sejam observadas com contraste e resolução adequados. Também pode ajudar a visualizar pequenas diferenças de altura nas superfícies dos materiais. Somente a luz polarizada é usada para iluminar o espécime. A luz polarizada é dispersa em dois raios de luz distintos com um plano ortogonal de polarização. À medida que os raios experimentam diferentes refrações ou dispersões no espécime, diferentes deslocamentos de fase ocorrem. Quando esses raios de luz se unem novamente, eles interferem e se tornam polarizados de maneira elíptica. Essa polarização pode ser alterada para uma mudança de amplitude por meio de um analisador. Mudanças de fase que correspondem a diferenças tão pequenas quanto 1/1000 de um comprimento de onda (quando detectadas com um sensor de câmera) podem ser observadas nas imagens do DIC. As imagens de microscopia DIC são semelhantes a um relevo e parecem ter uma sombra.

Um microscópio DIC é um microscópio de campo amplo convencional que usa filtros de polarização e prismas Wollaston.

A luz de uma fonte passa por um filtro e se torna polarizada a 45°. Após passar através de um prisma Wollaston, a luz é separada em componentes polarizados perpendiculares onde um é 0° e o outro é polarizado a 90°. A lente do condensador foca a luz do espécime, que é iluminada por 2 raios paralelos coerentes com polarização diferente. Os raios sofrem diferentes comprimentos de caminho óptico, já que pode haver diferenças na espessura ou no índice de refração ao longo do caminho em que eles passam através do espécime.

O resultado é um deslocamento de fase de um raio em comparação com o outro. Depois de passar pela objetiva e por outro prisma Wollaston, a luz perpendicularmente polarizada é recombinada para se tornar uma que seja polarizada a 135°. Dependendo das diferenças nos comprimentos do caminho óptico, a interferência dos dois raios resulta em interferência construtiva (clareamento) ou destrutiva (escurecimento), e as estruturas antes dificilmente visíveis com campo claro, se tornam agora observáveis com o DIC.

Por fim, a luz transmitida diretamente, que não sofreu nenhuma mudança de fase, é removida pelo filtro de polarização (também chamado de analisador), que permite que apenas a luz polarizada a 135° passe.